Tableta IGF 1 LR3

Základnou zložkouTableta IGF 1 LR3, IGF-1 LR3 (Long R3-IGF-1), je umelo syntetizovaný analóg inzulínu podobného rastového faktora-1, ktorý sa bežne používa vo vedeckom výskume alebo v špecifických medicínskych prostrediach vo forme injekcií. Je to jednoreťazcový alkalický polypeptid zložený zo 70 aminokyselín, syntetizovaný hlavne v pečeni a regulovaný rastovým hormónom (GH). Jeho štruktúra je podobná inzulínu, ale jeho aktivita podporujúca rast je oveľa vyššia ako u inzulínu. Aktivuje downstream signálne dráhy (ako je AKT a MAPK) väzbou na receptory typu tyrozínkinázy (IGF-1R), čím podporuje bunkovú proliferáciu, diferenciáciu a metabolickú reguláciu. Ako rastová prísada IGF-1 LR3 významne zvyšuje rýchlosť proliferácie a produkciu rekombinantného proteínu HEK293, CHO a iných buniek a je široko používaný v biofarmaceutickom priemysle. V modeloch transgénnych myší sa LR3 používa na štúdium vývoja svalov, metabolickej regulácie a mechanizmov starnutia. Napríklad dlhodobá injekcia LR3 môže oddialiť svalovú atrofiu a zlepšiť motorické schopnosti starších myší.

IGF 1 LR3 COA

IGF-1 LR3 (ľudský rastový faktor podobný inzulínu s dlhým{3}}reťazcom) je vysoko aktívny peptid, ktorý bol umelo modifikovaný. Modifikáciou aminokyselinovej sekvencie založenej na ľudskom IGF-1 výrazne zvyšuje biologickú stabilitu a aktivitu a má významnú aplikačnú hodnotu v oblastiach, ako je biomedicínsky výskum a vývoj, bunková kultúra atď.Tableta IGF 1 LR3(ľudský inzulín s dlhým{0}reťazcom-ako tablety rastového faktora) je komplexné systémové inžinierstvo, ktoré integruje viaceré oblasti technológie, ako je genetické inžinierstvo, procesy prípravy a kontrola kvality

Výrobný proces tabliet IGF-1 LR3 možno rozdeliť do troch základných etáp: príprava suroviny, formovanie formulácie, poťahovanie a balenie. Každý stupeň zahŕňa viacero jemných chemických procesov a vyžaduje prísnu kontrolu parametrov procesu, aby sa zabezpečila jednotnosť kvality produktu.

Príprava suroviny: Expresia a čistenie génového inžinierstva

IGF-1LR3 ako peptidovú látku nemožno vo veľkom meradle efektívne vyrábať chemickou syntézou. Hlavnou metódou je použitie technológie rekombinantnej expresie genetického inžinierstva na prípravu a jej proces dosiahol zrelú transformáciu z laboratórneho testovania v malom meradle na pilotné testovanie fermentačnej nádrže s objemom 150 l. Konkrétne kroky sú nasledovné:

Konštrukcia expresného systému

Prioritou by malo byť použitie eukaryotických expresných systémov s bežne používaným kmeňom Pichia pastoris GS115 ako hostiteľskou bunkou. Použitím technológie rekombinácie DNA bola molekula nukleovej kyseliny kódujúca IGF-1LR3 klonovaná do plazmidu pPICZ A, aby sa skonštruoval expresný vektor pPICZ-LR3IGF-1. Vektor musí obsahovať prvky, ako sú promótory a selektívne markerové gény (ako sú gény rezistencie na zeocín), aby sa zabezpečila stabilná expresia cieľového génu. Niektoré spoločnosti používajú aj expresný systém E. coli, ako napríklad produkty Wuhan Pronosai, ktoré dosahujú expresiu cieľových proteínov prostredníctvom E. coli.

Fermentácia s vysokou hustotou

Fermentačný proces je kľúčom k výrobe surovín a je potrebné dosiahnuť vsádzkovú fermentáciu v 10-150L fermentačných tankoch. Optimalizované základné parametre sú inokulačný objem 4 % a koncentrácia IPTG 0,8 mmol/l. Indukčná metóda zahŕňa väzbu laktózy a IPTG, s indukčným časom 4 hodiny. Počas fermentačného procesu je rozpustený kyslík kontrolovaný na 40% -60% a hodnota pH je udržiavaná stabilná. Po 12 hodinách fermentácie môže vlhká bakteriálna hmotnosť dosiahnuť 22-24 g/l a úroveň expresie cieľového proteínu predstavuje 25 % celkového proteínu. Počas fermentačného procesu je potrebné monitorovanie parametrov v reálnom čase, ako je bakteriálna biomasa, rozpustený kyslík, pH atď., aby sa udržal prísun živín prostredníctvom automatického kŕmneho systému a zabránilo sa hromadeniu metabolitov, ktoré inhibujú expresiu proteínov.

Fragmentácia baktérií a liečba inklúznych teliesok

Po fermentácii sa bakteriálne bunky zhromaždili centrifugáciou a sonikovali, aby sa bunky rozbili, pričom sa uvoľnili inklúzne telieska obsahujúce cieľový proteín. Na zlepšenie čistoty inklúznych teliesok sú potrebné tri gradientové premývania. Najprv dvakrát premyte 2 mol/l močoviny a potom raz premyte pufrom PBS. Po ošetrení sa môže podiel cieľového proteínu v inklúznych telieskach zvýšiť na 50 %. Následne boli inklúzne telieska rozpustené v denaturačnom roztoku (pH 8,0) obsahujúcom 8 mol/l močoviny, 0,1 mol/l Tris HCl a 10 mmol/l DTT, aby sa zaistilo úplné rozvinutie proteínu a príprava na následné opätovné skladanie.

Renaturácia a čistenie bielkovín

Na opätovné skladanie sa používa zriedená metóda refoldingu a najvhodnejší vzorec refoldingového roztoku je 0,1 mol/l Tris HCl, 1 mmol/l EDTA, 3 mmol/l oxidovaného glutatiónu, 1 mmol/l redukovaného glutatiónu a 1 % glycínu (pH 8,0). Po zriedení sa proteín mieša pri 4 stupňoch počas 12 hodín, aby sa podporilo správne skladanie. V procese čistenia sa používa kombinovaný proces chromatografie. Najprv sa pomocou gélovej chromatografie na Sephadexu G -50 odstránia malé molekulárne nečistoty a potom sa ďalej purifikujú pomocou iónomeničovej chromatografie na SP - Sepharose F. F. Nakoniec sa získa vysoko čistý proteín IGF-1 LR3. Jeho molekulová hmotnosť a sekvencia aminokyselín sú úplne v súlade s teoretickou hodnotou prostredníctvom detekcie.

Príprava lyofilizovaného-prášku

Vyčistený proteín je ošetrený technológiou sušenia vymrazovaním- a voda je priamo sublimovaná z pevnej látky na plyn pri nízkej teplote a nízkom tlaku, čím sa vytvorí stabilný biely kryštalický prášok. Tento proces zabezpečuje, že proteíny zostávajú aktívne počas skladovania a prepravy. Lyofilizovaný prášok môže byť stabilne skladovaný niekoľko týždňov pri izbovej teplote a môže byť skladovaný niekoľko rokov pri -80 stupňoch.

Formovanie: kľúčový proces pri príprave tabliet

Peptidové vlastnostiTableta IGF 1 LR3aby boli citlivé na gastrointestinálne prostredie a tabletové formulácie musia riešiť problémy, ako je nízka biologická dostupnosť a náchylnosť na enzymatickú degradáciu. Preto je potrebná cielená optimalizácia pri navrhovaní receptov a výbere procesov. Proces formovania jeho formulácie sa vzťahuje na všeobecný proces peptidových tabliet a je upravený podľa jeho vlastných charakteristík takto:

1

 

Návrh predpisu a skríning pomocných látok

Návrh predpisu by mal brať do úvahy stabilitu proteínu, rýchlosť rozpúšťania a tvarovateľnosť. Mikrokryštalická celulóza a laktóza by sa mali použiť ako riedidlá v pomere približne 3:1, aby sa zabezpečila tvrdosť tabliet a uľahčilo sa rozpúšťanie; Lepidlo používa 5% vodný roztok polyvinylpyrolidónu K30, aby sa zabránilo poškodeniu proteínovej štruktúry organickými rozpúšťadlami; Vybraným dezintegračným činidlom je sodná soľ zosieťovanej karboxymetylcelulózy s prídavkom 3 % až 5 %, aby sa zabezpečila rýchla dezintegrácia tablety v gastrointestinálnom trakte; Použitým lubrikantom je stearan horečnatý, s dávkou 0,5 %, na zníženie trenia počas kompresie; Súčasné pridanie 1% -2% meglumínu ako solubilizátora na zlepšenie rozpustnosti IGF-1 LR3 vo vode.

2

 

Drvenie a preosievanie

Lyofilizovaný prášok IGF-1 LR3 a pomocné látky rozomeľte oddelene pomocou drviča s prúdením vzduchu, pričom veľkosť častíc D90 suroviny regulujte na 20 – 30 μm a prispôsobte veľkosť častíc pomocnej látky surovine, aby ste predišli nerovnomernému miešaniu v dôsledku rozdielov vo veľkosti častíc. Po rozdrvení prejdite cez sito 80 mesh, aby ste odstránili zhluknuté častice a nečistoty, čím sa zabezpečí tekutosť materiálu.

3

 

Miešanie a granulácia

Surový materiál IGF-1 LR3 bol na začiatku zmiešaný s riedidlom a dezintegračným činidlom s použitím rovnakého prírastkového spôsobu počas 30 minút, aby sa zabezpečila rovnomerná disperzia surového materiálu. Následne sa pridalo polyvinylpyrolidónové lepidlo K30 a uskutočňovala sa granulácia za mokra s použitím rotačného granulátora (16 mesh sito) na granuláciu. Mokré častice by sa mali sušiť pri teplote 40-45 stupňov počas 2-3 hodín s kontrolovaným obsahom vlhkosti 3% -5%. Teplota sušenia by mala byť prísne kontrolovaná, aby sa zabránilo denaturácii bielkovín spôsobenej vysokými teplotami. Po vysušení sa častice preosejú cez sito 20 mesh, aby sa odstránili veľké častice a jemný prášok.

4

 

Lisovanie tabliet

Vyberte 8 mm plytkú konkávnu matricu na lisovanie tabliet s lisovacou silou regulovanou na 18-20KN, tvrdosťou tablety udržiavanou na 60-80N a rozdielom hmotnosti tablety regulovaným v rozmedzí ± 3 %. Počas procesu lisovania tabliet sa vyžaduje monitorovanie hmotnosti, tvrdosti a krehkosti tabliet v reálnom čase, pričom odber vzoriek a testovanie prebieha každých 15 minút, aby sa predišlo chybám kvality spôsobeným kolísaním parametrov zariadenia. Súčasne musí tabletovací lis prejsť aseptickým ošetrením a výrobné prostredie by malo byť kontrolované v čistom priestore na úrovni D s teplotou 18-26 stupňov a relatívnou vlhkosťou 45% -65%.

5

 

Náter

Na ochranu IGF-1 LR3 pred poškodením gastrointestinálnymi enzýmami sa používa proces poťahovania tenkým filmom. Poťahovací roztok používa OBA premix, zriedený čistenou vodou na koncentráciu 15 % a potiahnutý pomocou účinného poťahovacieho stroja. Počas procesu nanášania by sa mala teplota vstupného vzduchu regulovať na 45-50 stupňov, teplota výstupného vzduchu na 30-35 stupňov, rýchlosť striekania 5-8 ml/min a hmotnosť povlaku by sa mala zvýšiť o 2-3%. Povrch potiahnutých tabliet je hladký, čo môže oddialiť rozpustenie žalúdka, rýchlo uvoľniť liečivá v čreve a zlepšiť biologickú dostupnosť.

 

Hlavné výrobné zariadenia a funkcie

Výrobné zariadenie preTableta IGF 1 LR3pokrýva viaceré oblasti, ako je biologická fermentácia, formovanie formulácií a kontrola a testovanie. Presnosť a stabilita zariadenia priamo ovplyvňuje kvalitu produktu. Špecifický zoznam vybavenia a funkcie sú nasledovné:

Populárne Tagy: igf 1 lr3 tablet, dodávatelia, výrobcovia, továreň, veľkoobchod, kúpiť, cena, hromadne, na predaj