Tiazolylová modrá CAS 298-93-1

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. je jedným z najskúsenejších výrobcov a dodávateľov tiazolyl blue cas 298-93-1 v Číne. Vitajte vo veľkoobchodnom veľkoobchodnom vysokokvalitnom tiazolylovom modrom cas 298-93-1 na predaj tu z našej továrne. Dobré služby a rozumná cena sú k dispozícii.

Tiazolylová modrá, známejší ako MTT (3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazóliumbromid), v sebe ukrýva fascinujúcu dualitu – je to životne dôležitý nástroj v bunkovej biológii a zároveň chameleónska chemická zvláštnosť. Tento žltý kryštalický prášok prechádza v živých bunkách prekvapivou metamorfózou: mitochondriálne reduktázy štiepia jeho tetrazóliový kruh a premieňajú ho na nerozpustnú fialovú formazánovú zrazeninu – reakcia je tak vizuálne pozoruhodná, že sa stala zlatým štandardom na meranie životaschopnosti buniek. Napriek tomu, mimo laboratória, MTT odhaľuje viac ezoterického správania; jeho kryštalická štruktúra vytvára pod mikroskopom zvláštne vzory „rybie kosti“, zatiaľ čo jeho redoxné vlastnosti mu umožňujú zúčastňovať sa na exotických fotochemických reakciách, keď je vystavený špecifickým vlnovým dĺžkam svetla. Je zvláštne, že zlúčenina vykazuje vzácny jav nazývaný "metachromasia" - objavujúce sa rôzne farby v závislosti od koncentrácie a molekulárneho prostredia - vlastnosť, ktorú kedysi využívali textilní chemici na vytváranie "inteligentných" farbív. Nedávne štúdie odhalili jeho neočakávanú úlohu ako slabého inhibítora určitých enzýmov dýchacieho reťazca, čo naznačuje, že toto všadeprítomné testovacie činidlo mohlo jemne ovplyvňovať metabolické procesy, ktoré ho vedci používajú na štúdium. Keď sa roztoky MTT rozpustia v organických rozpúšťadlách, vykazujú nezvyčajný efekt zhášania fluorescencie, ktorý zmiatol fyzikálnych chemikov, čo naznačuje, že komplexné medzimolekulové interakcie stále čakajú na úplné vysvetlenie.

Tiazolylová modrá,Chemický názov je 3-(4,5-dimetyl-2-tiazol)-2,5-difenyltetrazóliumbromid, skrátene MTT, čo je dôležitá organická zlúčenina. Odkedy Mosman v roku 1983 prvýkrát ohlásil použitie farbenia MTT na určenie rastu a prežitia buniek, MTT sa široko používa v oblastiach, ako sú biologické vedy, lekársky výskum a vývoj liekov. Nasleduje podrobné vysvetlenie jeho účelu:

Aplikácia vo výskume bunkovej biológie

 

MTT je jednou z klasických metód na stanovenie bunkovej proliferácie. Počas bunkovej kultúry môžu dehydrogenázy, ako je sukcinátdehydrogenáza v mitochondriách živých buniek, redukovať exogénny MTT na nerozpustný modrofialový kryštalický formazan, ktorý sa ukladá v bunke. Mŕtve bunky nemajú túto redukčnú schopnosť, a preto neprodukujú formazan. Rozpustením formazanu v bunkách a meraním jeho hodnoty absorpcie svetla pri špecifických vlnových dĺžkach (ako je 490 nm alebo 562 nm) pomocou čítačky s enzýmovým -imunosorbentným testom (ELISA) sa môže počet živých buniek nepriamo odraziť. V určitom rozsahu počtu buniek je množstvo vytvorených kryštálov MTT úmerné počtu buniek, takže bunkovú proliferáciu možno určiť na základe nameranej hodnoty absorbancie (hodnota OD).

Aplikácia vo výskume bunkovej biológie

 

MTT možno použiť aj na stanovenie toxicity liekov alebo iných liečebných metód (ako je ožarovanie) na kultivovaných bunkách in vitro. Porovnaním hodnôt OD liečenej skupiny a kontrolnej skupiny možno vyhodnotiť účinok liekov alebo liečebných metód na bunkovú aktivitu. Čím väčšia je hodnota OD, tým silnejšia je bunková aktivita; Naopak, naznačuje, že čím slabšia je bunková aktivita alebo tým väčšia je bunková toxicita. Táto metóda má široké uplatnenie pri skríningu liekov, toxikologickom výskume a iných oblastiach. Hoci sa MTT používa hlavne na meranie bunkovej proliferácie a cytotoxicity, v niektorých prípadoch sa môže použiť aj na pomoc pri štúdiu bunkovej apoptózy. Počas procesu bunkovej apoptózy sa mení aktivita enzýmu vo vnútri bunky, čo môže ovplyvniť redukčnú schopnosť MTT. Porovnaním rozdielu v hodnotách OD medzi apoptotickými bunkami a normálnymi bunkami je možné predbežne určiť výskyt bunkovej apoptózy. Treba však poznamenať, že MTT nie je špecializovaná metóda na detekciu bunkovej apoptózy a jej výsledky je potrebné komplexne analyzovať v spojení s inými metódami detekcie apoptózy.

Aplikácia pri vývoji liekov

 

V procese vývoja liekov je test MTT bežne používanou vysoko{0}}výkonnou metódou skríningu liekov. Spoločnou inkubáciou testovaného liečiva s bunkami a použitím MTT testu na meranie zmien v bunkovej aktivite je možné rýchlo skrínovať potenciálne aktívne molekuly liečiva. Táto metóda má výhody ľahkej prevádzky, spoľahlivých výsledkov a vysokej výkonnosti a má dôležitú aplikačnú hodnotu v ranom štádiu vývoja lieku. Test MTT možno použiť aj na štúdium mechanizmu účinku liečiv. Porovnaním zmien v bunkovej aktivite za rôznych podmienok liečby liekom možno predbežne určiť vplyv liekov na procesy, ako je bunková proliferácia a apoptóza. Kombináciou iných techník molekulárnej biológie, ako je Western blot a prietoková cytometria, možno ďalej odhaliť ciele a signálne dráhy liečiv. Pri hodnotení bezpečnosti lieku sa môže použiť test MTT na posúdenie toxických účinkov liekov na bunky. Meraním zmien hodnôt OD buniek po liečbe liekom je možné určiť, či má liek cytotoxicitu a silu toxicity. To má veľký význam pre usmerňovanie predklinického výskumu a klinického použitia liekov.

Aplikácia MTT v iných oblastiach

 

V imunologickom výskume môže byť MTT test použitý na stanovenie proliferačnej schopnosti lymfocytov. Spoločnou inkubáciou lymfocytov s antigénmi alebo imunostimulantmi a meraním zmien v bunkovej aktivite pomocou MTT testu možno vyhodnotiť schopnosť imunitnej odpovede lymfocytov. Táto metóda má široké uplatnenie vo vývoji vakcín, imunoterapii a iných oblastiach. V onkologickom výskume môže byť MTT test použitý na stanovenie proliferačnej aktivity a liekovej citlivosti nádorových buniek. Porovnaním zmien hodnôt OD nádorových buniek za rôznych podmienok liečby liekmi možno skrínovať molekuly liečiva s inhibičnými účinkami na nádorové bunky a hodnotiť ich proti-nádorové účinky. To má veľký význam pre usmerňovanie klinickej liečby nádorov. V environmentálnom toxikologickom výskume možno test MTT použiť na vyhodnotenie toxických účinkov látok znečisťujúcich životné prostredie na bunky. Spoločnou inkubáciou buniek s rôznymi koncentráciami znečisťujúcich látok a meraním zmien bunkovej aktivity pomocou MTT testu je možné určiť toxicitu a mechanizmus účinku znečisťujúcich látok. To má veľký význam pre hodnotenie ekologických rizík látok znečisťujúcich životné prostredie a formulovanie politík ochrany životného prostredia. 

Experimentálne krokytiazolylová modrámetóda:

1: Trypsín štiepi bunky logaritmickej fázy, centrifuguje a po ukončení ich zbiera, aby sa vytvorila bunková suspenzia, a upravuje svoju koncentráciu na 5-10 počtom buniek × 104/ml. Pre začiatočníkov je potrebné, aby bunky dosiahli 5-10 × 104/ml, často nevie, kde začať. Som tu, aby som vám poskytol jednoduchú metódu na počiatočné určenie počtu buniek.

Ako príklad si vezmite 25 cm2 bežne používaných na kultiváciu buniek:

1) Hustota buniek je približne 80 % ~ 90 % (obrázok nižšie zobrazuje približný stav buniek pri hustote 80 % ~ 90 %). Po štiepení a odstredení odstráňte supernatant a pridajte 3 ml média na premiešanie.

2) Vezmite novú 15 ml sterilnú centrifugačnú skúmavku (na ďalší krok očkovania 96-jamkovej platne) a naplňte ju približne 9 ml média

3) Odoberte 1 ml z 3 ml bunkovej suspenzie pripravenej v prvom kroku, pridajte ju do hornej skúmavky a po premiešaní spočítajte bunky. V tomto čase je to všeobecne 5-10 alebo menej x 104/ml, čo je ekvivalentné 5-10 bunkám na bunku v 4 bunkách dosky na počítanie buniek (pozri obrázok nižšie); Ak koncentrácia nie je dostatočná, pridá sa bunková suspenzia podľa výsledku počítania a každá kvapka sa vypočíta ako 50 ul.

4) Počet buniek by sa mal upraviť podľa rôznych účelov experimentu. Napríklad vo všeobecnom experimente bunkovej proliferácie sa môže použiť 2000 buniek na jamku (ekvivalent hustoty bunkovej suspenzie 2 x 104/ml), 5000 až 10000 buniek na jamku (ekvivalent hustoty bunkovej suspenzie 5 x 104/ml). Okrem toho by sa mal počet buniek určiť aj podľa ich vlastných charakteristík, ako je rýchlosť rastu. Napríklad hustota rýchlejšie rastúcich buniek môže byť o niečo menšia.

2. Po príprave bunkovej suspenzie ju jemne premiešajte a pridajte 100 ul do každého otvoru tak, aby hustota buniek, ktoré sa majú testovať, bola 5000-10000/otvor (okrajový otvor je naplnený sterilným PBS).

L Poznámka: Pretože sa bunky po zmiešaní budú naďalej usadzovať, je potrebné počas procesu očkovania opakovane miešať, ako je premiešanie raz za každých šesť otvorov, aby sa zabezpečilo, že hustota buniek očkovania bude medzi otvormi úplne rovnaká, čo je rozhodujúce pre výsledky MTT.

3. Vložte naočkovanú platňu s bunkovou kultúrou do inkubátora na kultiváciu, kým bunková monovrstva nebude pokrytá dnom otvoru (96-jamková plochá platňa), a pridajte liek s koncentračným gradientom. V zásade sa liek môže pridať po priložení bunky k stene, alebo dve hodiny alebo pol dňa, ale často pridávame liek popoludní predchádzajúceho dňa a nasledujúci deň ráno. Vo všeobecnosti sa nastavuje 5-7 gradientov, 100 ul na otvor a 3-5 viacnásobných otvorov. Odporúča sa nastaviť 6, inak je ťažké reflektovať skutočný stav. Nasledujúci obrázok možno použiť ako referenčný krok pre 96-dierovú platňu.

L Na dávkovanie niektorí ľudia priamo pridávajú lieky do 96-jamkových doštičiek v rôznych objemoch, aby vytvorili koncentračný gradient. Ale myslím si, že by sme sa mali pokúsiť zmiešať rôzne koncentrácie liekov v EP skúmavke, potom odstrániť kultivačný supernatant z 96-jamkovej platne (ktorý je možné odsať pomocou výbojovej pištole) a pridať 100 ul kultivačného média obsahujúceho rôzne koncentrácie liekov, čo môže zabezpečiť presnosť koncentrácie lieku. Okrem toho je potrebné poznamenať, že ak sa použije táto metóda, pred pridaním lieku neodsávajte všetok roztok kultúry z 96-jamkovej platne. Vzorky by ste mali pridať ihneď po nasatí jej časti, aby ste predišli bunkovej smrti v dôsledku vyschnutia 96-jamkovej platne.

Inkubujte s 4,5 % CO2 pri 37 stupňoch počas 16-48 hodín a pozorujte účinok lieku pod inverzným mikroskopom. Nasledujúci obrázok ukazuje typický gradient cytotoxicity lieku.

4. Pridajte 10 ul roztoku MTT (5 mg/ml, tj . 0.5 % MTT) do každej jamky a pokračujte v kultivácii počas 4 hodín. Ak liek môže reagovať stiazolylová modrákultivačný roztok sa môže po centrifugácii zlikvidovať a kultivačný roztok obsahujúci MTT sa môže pridať po premytí PBS 2-3 krát.

5. Zastavte kultiváciu a pripravte na rozpustenie a kryštalizáciu.

Tiazolylová modrá, ktorej čínsky názov je metylová modrá, je dôležitá organická zlúčenina, ktorá sa široko používa v medicíne, biológii a chémii. v medicíne sa často používa na liečbu otravy dusitanmi, otravy kyanidom atď. a používa sa aj pri diagnostike a adjuvantnej liečbe niektorých chorôb;V biologickom výskume sa môže použiť ako farbivo na označovanie buniek alebo tkanív. Avšak, rovnako ako mnohé lieky, metylénová modrá môže mať počas užívania aj rad vedľajších účinkov:

Nežiaduce účinky na tráviaci systém

Nevoľnosť a vracanie sú jedným z bežných vedľajších účinkov metylénovej modrej na tráviaci systém. Keď metylénová modrá vstúpi do tela, môže stimulovať gastrointestinálnu sliznicu, čo spôsobí nevoľnosť a v závažných prípadoch dokonca zvracanie. Tento príznak je výraznejší, keď je rýchlosť intravenóznej injekcie príliš rýchla alebo dávka je príliš veľká. Napríklad v niektorých klinických prípadoch môžu pacienti pociťovať závažnú nevoľnosť a vracanie krátko po rýchlej intravenóznej injekcii metylénovej modrej, čo ovplyvňuje ich pohodlie a skúsenosti s liečbou. Niektorí pacienti môžu po použití metylénovej modrej pociťovať bolesť brucha a stupeň bolesti sa môže líšiť v závislosti od individuálnych rozdielov, od mierneho nepohodlia až po silnejšiu bolesť.

Zároveň ju môžu sprevádzať aj hnačky, ktoré môžu byť spôsobené zásahom metylénovej modrej na peristaltiku čriev a tráviace funkcie, čo vedie k abnormálnemu pohybu čriev a zmenám v sekrécii tráviacej tekutiny. Dlhodobý alebo častý výskyt bolestí brucha a hnačky ovplyvňuje nielen vstrebávanie živín a fyzické zdravie pacienta, ale môže viesť aj k ďalším komplikáciám.

Vedľajšie účinky na močový systém

Po užití metylénovej modrej sa farba moču zmení na modrú, čo je spôsobené vylučovaním metylénovej modrej a jej metabolitov do moču obličkami. Vo všeobecnosti je táto zmena farby moču dočasná a nebude mať vážny vplyv na fyzické zdravie. Ale v niektorých špeciálnych prípadoch, ako sú pacienti s ochoreniami močového systému, môžu zmeny farby moču interferovať s diagnózou ochorenia a lekári musia vykonať komplexnú analýzu založenú na iných indikátoroch vyšetrenia. Počas močenia môžu niektorí pacienti pociťovať štípanie pri ústí močovej rúry.

 

Môže to byť spôsobené stimulačným účinkom metylénovej modrej na sliznicu močovej rúry, najmä pri vysokej koncentrácii moču alebo pri trení sliznice močovej rúry počas močenia bude pocit štípania výraznejší. Tento príznak môže pacientom spôsobiť určité nepohodlie a ovplyvniť ich každodenný život.

Neurologické vedľajšie účinky

Závraty a bolesť hlavy sú bežné neurologické vedľajšie účinky metylénovej modrej. Po použití metylénovej modrej môžu pacienti pociťovať závraty a dezorientáciu v hlave alebo pociťovať nepríjemné pocity, ako je opuch a bolesť hlavy. Tento príznak môže ovplyvniť pozornosť a schopnosť myslenia pacienta a znížiť efektivitu práce a života. Výskyt závratov a bolesti hlavy môže súvisieť s účinkami metylénovej modrej na mozgové cievy a nervy a špecifický mechanizmus si ešte vyžaduje ďalší výskum. V zriedkavých prípadoch môže metylénová modrá spôsobiť poruchy vedomia, ako je ospalosť, kóma atď.

Je to zvyčajne spôsobené nadmerným používaním metylénovej modrej alebo nadmernou citlivosťou pacientov na liek, čo spôsobuje závažnú inhibíciu centrálneho nervového systému. Poruchy vedomia sú závažným vedľajším účinkom, ktorý môže ohroziť bezpečnosť života pacienta a vyžaduje okamžitú záchrannú liečbu.

1.Aké je použitie tiazolylovej modrej tetrazóliumbromidu?

Tiazolylová modrá Tetrazóliová modrá (MTT) sa môže použiť na meranie bunkovej proliferácie. MTT vytvára žltkastý roztok, ktorý sa mitochondriálnymi dehydrogenázami živých buniek premieňa na tmavomodrý, vo vode -nerozpustný MTT formazan.

2. Je Thiazolyl Blue bezpečné skladovať?

Teplotné podmienky: Prášok uzavrite a skladujte v chladničke pri teplote -20 stupňov na konzerváciu mrazom, čo môže účinne predĺžiť trvanlivosť (zvyčajne 1–2 roky); na krátkodobé skladovanie (do 1 mesiaca) sa môže dočasne uchovávať pri 4 stupňových podmienkach chladenia.

Požiadavky odolné voči svetlu-a vlhkosti-: MTT prášok je citlivý na svetlo-a mal by sa skladovať v hnedých reagenčných fľašiach alebo priehľadných fľašiach zabalených v cínovej fólii. Medzitým by sa mali pridať sušiace činidlá (napr. silikagél), aby sa zabránilo absorbovaniu vlhkosti a spekaniu prášku.

3. Zmení sa farba tiazolylovej modrej?

Keď roztok vykazuje modrofialovú zrazeninu alebo stmavne, znamená to, že bol oxidovaný a nemožno ho ďalej používať.
Neumiestňujte roztok pri izbovej teplote alebo v svetlom prostredí, pretože môže rýchlo zlyhať.

Populárne Tagy: tiazolyl blue cas 298-93-1, dodávatelia, výrobcovia, továreň, veľkoobchod, kúpiť, cena, hromadne, na predaj