Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. je jedným z najskúsenejších výrobcov a dodávateľov 3xflag peptidu cas 402750-12-3 v Číne. Vitajte vo veľkoobchodnom veľkoobchodnom vysokokvalitnom 3xflag peptide cas 402750-12-3 na predaj tu z našej továrne. Dobré služby a rozumná cena sú k dispozícii.
Peptid 3XFLAGje dôležitá sekvencia peptidového markera široko používaná pri expresii proteínov a procesoch čistenia v biomedicínskom výskume. Molekulový vzorec C120H169N31O49S, CAS 402750-12-3. Jeho sekvencia pozostáva z 23 aminokyselín a obsahuje tri opakované motívy Asp Tyr Lys Xaa Xaa Asp, ktoré jej dávajú špecifické štruktúrne vlastnosti.
Má dobrú rozpustnosť v špecifických rozpúšťadlách. Napríklad v DMSO je jeho rozpustnosť vysoká, takže je vhodný na operácie a experimenty v roztoku. Okrem toho môže tiež dosiahnuť dobrý rozpúšťací účinok vo vode miernym zahrievaním. Má tiež niektoré špeciálne vlastnosti. Napríklad má dobrú antigenicitu a reaktivitu a môže sa viazať na špecifické protilátky anti FLAG. Táto väzbová schopnosť ho robí široko použiteľným v experimentoch, ako je imunoprecipitácia. Kompetitívnou väzbou na anti FLAG protilátky môže byť fúzny exprimovaný proteín FLAG, ktorý sa viaže na anti FLAG protilátky, eluovaný počas imunoprecipitácie, čím sa dosiahne lokalizácia, detekcia a purifikácia cieľového proteínu.
|
Prispôsobené uzávery fliaš a zátky:
|
|
|
Chemický vzorec |
C120H169N31O49S |
|
Presná hmotnosť |
2860 |
|
Molekulová hmotnosť |
2862 |
|
m/z |
2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%) |
|
Elementárna analýza |
C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12 |
Peptid 3XFLAGje značka používaná pri výskume bielkovín, pozostávajúca z 8 aminokyselín so sekvenciou DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Jeho hlavnou funkciou je slúžiť ako marker na expresiu a purifikáciu proteínov, čo poskytuje pohodlný a účinný prostriedok vo výskume.
1. Afinitná purifikácia:
Môže byť použitý ako značka na purifikáciu proteínu a vďaka svojej vysokej afinite s anti FLAG protilátkami môže byť cieľový proteín ľahko purifikovaný. Zvyčajne sa cieľový proteín kotransfekuje do buniek expresným vektorom obsahujúcim 3X FLAG PEPTIDE a potom sa purifikuje afinitou s použitím anti FLAG protilátok, aby sa rýchlo a účinne získal cieľový proteín s vysokou čistotou.
2. Imunologické testovanie:
Vďaka svojej vysokej imunogenicite sa môže použiť na detekciu expresie a lokalizácie proteínu. Použitím špecifických anti FLAG protilátok možno uskutočniť experimentálne techniky, ako je imunoblotovanie a imunofluorescenčné farbenie, aby sa rýchlo a presne detegovala hladina expresie a distribúcia cieľových proteínov.
3. Filtrovanie klonov:
Môže sa tiež použiť na uľahčenie skríningu proteínových klonov. V procese konštrukcie proteínových expresných vektorov môže spojenie génovej sekvencie cieľového proteínu so sekvenciou 3XFLAG uľahčiť skríning pozitívnych klonov s cieľovým proteínom prostredníctvom imunitnej detekcie a iných metód, čím sa urýchli proces výskumu funkcie proteínu.
4. Imunoprecipitácia:
Môže sa tiež použiť na experimenty s imunoprecipitáciou proteínov. Naviazaním proteínov obsahujúcich značky 3X FLAG PEPTIDE na anti FLAG protilátky a potom použitím adsorpčných materiálov, ako je proteínová A/G agaróza alebo magnetické guľôčky, je možné cieľový proteín a jeho interakčných partnerov selektívne vyzrážať z bunkových extraktov na štúdium siete interakcií s proteínmi.
5. Skríning liekov:
Môže sa použiť aj pri výskume skríningu drog. Kombináciou značky 3X FLAG PEPTIDE s požadovaným proteínom je možné dosiahnuť vysokovýkonný skríning proteínu. Táto metóda skríningu sa môže použiť na objavenie nových cieľových liekov, vyhodnotenie interakcií medzi liekmi a proteínmi atď.
6. Výskum funkcie bielkovín:
Zavedenie značiek významne neovplyvňuje prirodzenú štruktúru a funkciu proteínov, a preto sa môže použiť na štúdium biologických funkcií, subcelulárnej lokalizácie, interakcií a prenosu signálu proteínov. Zavedením značky 3X FLAG PEPTIDE je možné uskutočniť-hĺbkový výskum biologických charakteristík proteínov, čo pomáha odhaliť mechanizmy ich pôsobenia v bunkovej biológii a fyziológii.
Peptid 3XFLAGje peptid obsahujúci 8 aminokyselín so sekvenciou DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Bežne sa používa ako proteínová značka na pohodlné čistenie, detekciu a výskum cieľových proteínov. V procese biosyntézy sa môže pripraviť chemickou syntézou alebo metódami genetického inžinierstva. Nasledujú podrobné kroky metód genetického inžinierstva:
1. Navrhnite a syntetizujte gény:
Najprv je potrebné navrhnúť umelý gén obsahujúci sekvenciu 3X FLAG PEPTIDE. Tento gén by mal obsahovať sekvenciu 3X FLAG PEPTIDE, ako aj vhodné promótory, terminátory a selekčné markery (ako sú gény tolerancie voči antibiotikám). Návrh génov by mal zohľadňovať charakteristiky a potreby expresie cieľového hostiteľa.
2. Klonovanie génov:
Ďalej budú navrhnuté umelé gény klonované do vhodných expresných vektorov. Bežne používané vektory zahŕňajú plazmidy, vírusové vektory atď. Proces klonovania typicky zahŕňa nasledujúce kroky:
-Amplifikácia PCR: Použitie polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) na amplifikáciu sekvencie cieľového génu z templátovej DNA.
-Štiepenie a spojenie: Produkty PCR sú štiepené expresnými vektormi pomocou reštrikčných endonukleáz a potom sú navzájom spojené DNA ligázami.
-Transformácia: Transformácia pripojeného expresného vektora do bakteriálnych hostiteľov, ako je Escherichia coli, za vzniku rekombinantného plazmidu.
-Identifikácia: Rekombinantné plazmidy boli identifikované pomocou PCR, enzymatickým štiepením, sekvenovaním DNA a inými metódami, aby sa potvrdilo, že cieľový gén bol úspešne klonovaný do vektora.
3. Cieľový proteín expresie:
Transfekujte skonštruovaný expresný vektor do cieľových hostiteľských buniek, ako sú bunky cicavcov, kvasinkové bunky, bunky hmyzu atď. V bunkách sa expresný vektor prepíše do mRNA a potom sa preloží do proteínov. 3X FLAG PEPTIDE bude exprimovaný spolu s cieľovým proteínom ako proteínová značka.
4. Extrakcia bielkovín:
Zozbierajte transfekované bunky a vykonajte bunkovú fragmentáciu, centrifugáciu a ďalšie ošetrenia, aby ste získali celkový proteínový extrakt.
5. Purifikovaný proteín:
Použitím techník afinitnej purifikácie, ako je imunoprecipitácia a afinitná chromatografia, sa cieľové proteíny obsahujúce značky 3X FLAG PEPTIDE purifikovali z celkového extraktu. To zvyčajne zahŕňa naviazanie anti FLAG protilátok na proteíny obsahujúce 3X FLAG PEPTIDE a ich následné oddelenie pomocou afinitných chromatografických kolón alebo magnetických guľôčok.
6. Identifikujte proteíny:
Purifikovaný proteín bol identifikovaný a kvantifikovaný pomocou SDS-PAGE gélovej elektroforézy, imunoblotovania, hmotnostnej spektrometrie a ďalších technológií, aby sa zabezpečila jeho čistota a integrita.
Nežiaduce reakcie
V biomedicínskom výskume a experimentoch súvisiacich s proteínmi hrajú tag peptidy kľúčovú úlohu. Môžu pomôcť výskumníkom pri čistení, detekcii a lokalizácii cieľových proteínov, čím výrazne podporujú rozvoj vedy o proteínoch.Peptid 3XFLAGje bežný a široko používaný tag peptid zložený z troch opakovaných FLAG tag sekvencií. Značka FLAG bola pôvodne navrhnutá Hoppom a kol. v roku 1988 a neskôr sa vyvinul do variantov, ako je 3XFLAG, ktoré majú vysokú afinitu a špecifickosť a môžu sa viazať na špecifické protilátky, čo uľahčuje následnú izoláciu a identifikáciu. Hoci 3XFLAG priniesol mnoho vymožeností v experimentoch, podobne ako iné biologické látky, môže spôsobiť aj niektoré nežiaduce reakcie.
Nežiaduce reakcie súvisiace s imunitou
Imunogenicita
Imunogenicita sa týka schopnosti látky stimulovať imunitný systém tela, aby vyvolal imunitnú odpoveď. 3XFLAG, ako exogénny peptidový segment, môže byť imunitným systémom tela rozpoznaný ako „nevlastný“ komponent, čím sa spustí imunitná odpoveď. Hoci je sekvencia 3XFLAG relatívne krátka, v niektorých prípadoch môže stále aktivovať B bunky a T bunky, čo vedie k produkcii protilátok. Tieto protilátky sa nielen viažu na voľný 3XFLAG, ale môžu tiež rozpoznávať a viazať sa na fúzne proteíny exprimujúce značku 3XFLAG, čo ovplyvňuje normálnu funkciu a distribúciu fúzneho proteínu.
Alergické reakcie
Alergická reakcia je abnormálna imunitná odpoveď spôsobená nadmernou citlivosťou imunitného systému na určité alergény. Jednotlivci môžu mať alergické reakcie pri používaní 3XFLAG na experimentovanie alebo liečbu. Závažnosť príznakov alergických reakcií je rôzna. Mierne prípady sa môžu prejaviť lokálnymi príznakmi, ako je svrbenie, vyrážka a erytém, zatiaľ čo závažné prípady môžu vyvolať systémové alergické reakcie, ako je anafylaktický šok, charakterizovaný prudkým poklesom krvného tlaku, ťažkosťami s dýchaním a stratou vedomia, čo predstavuje vážnu hrozbu pre bezpečnosť života.
Alergické reakcie
Mechanizmus alergických reakcií súvisí najmä s IgE protilátkami v imunitnom systéme. Keď telo prvýkrát príde do kontaktu s 3XFLAG, imunitný systém ho rozpozná ako alergén a stimuluje B bunky, aby produkovali špecifické IgE protilátky. Tieto IgE protilátky sa viažu na povrch žírnych buniek a eozinofilov. Keď sa telo opäť dostane do kontaktu s 3XFLAG, naviaže sa na IgE protilátky na bunkovom povrchu, čím spustí žírne bunky a eozinofily, aby uvoľnili bioaktívne mediátory, ako sú histamín a leukotriény, čo vedie k výskytu alergických symptómov.
Riziko autoimunitných ochorení
Dlhodobá alebo opakovaná expozícia 3XFLAG môže zvýšiť riziko vzniku autoimunitných ochorení. Autoimunitné ochorenia označujú typ ochorenia, pri ktorom imunitný systém tela omylom napadne svoje vlastné tkanivá a orgány, čo vedie k poškodeniu tkaniva a funkčnej poruche. 3XFLAG môže indukovať imunitný systém, aby produkoval skrížene reaktívne protilátky a T bunky prostredníctvom mechanizmu molekulárnej simulácie, kde je jeho aminokyselinová sekvencia podobná sekvencii určitých proteínov v samotnom tele.
Tieto imunitné bunky a protilátky nielen napádajú cudzí 3XFLAG, ale neúmyselne poškodzujú aj normálne tkanivá tela, čo vedie k autoimunitným ochoreniam. Napríklad určité autoimunitné ochorenia, ako je systémový lupus erythematosus a reumatoidná artritída, môžu súvisieť s autoimunitnými reakciami vyvolanými exogénnymi látkami. Hoci v súčasnosti neexistuje jasný dôkaz, ktorý by naznačoval, že 3XFLAG priamo spôsobuje autoimunitné ochorenia, toto potenciálne riziko nemožno ignorovať.
Vplyv na bunkovú funkciu
V niektorých experimentálnych štúdiách sa zistilo, že vysoké koncentrácie 3XFLAG môžu mať toxické účinky na bunky. Prejavy cytotoxicity zahŕňajú zmeny v morfológii buniek, narušenie integrity bunkovej membrány, zmeny vnútrobunkovej enzýmovej aktivity a inhibíciu bunkovej proliferácie. Jeho mechanizmus účinku môže súvisieť s interakciou medzi 3XFLAG a bunkovou membránou. Vďaka silnému zápornému náboju 3XFLAG,
môže sa viazať na kladne nabité zložky na bunkovej membráne prostredníctvom elektrostatických interakcií, meniť priepustnosť a tekutosť bunkovej membrány, čo vedie k úniku intracelulárnych látok alebo vstupu škodlivých látok zvonku, čím ovplyvňuje normálne fyziologické funkcie bunky. Okrem toho môže 3XFLAG vstúpiť aj do vnútra buniek, interferovať so signálnymi dráhami, syntézou proteínov a inými procesmi, čo ďalej zhoršuje poškodenie buniek.
Účinky na bunkové signálne dráhy
3XFLAG môže interferovať s intracelulárnymi signálnymi dráhami a ovplyvňovať normálne fyziologické aktivity buniek. Bunková signálna dráha je súhrnný termín pre sériu molekulárnych dejov, pri ktorých bunky reagujú na vonkajšie podnety, regulujúc dôležité procesy, ako je bunkový rast, diferenciácia a apoptóza. 3XFLAG môže interferovať s normálnym prenosom signálnych dráh interakciou s kľúčovými molekulami v signálnej dráhe, pričom mení aktivitu alebo úroveň expresie signálnych molekúl.
Napríklad sa môže viazať na receptory na bunkovom povrchu, pričom kompetitívne inhibuje väzbu prirodzených ligandov na receptory a blokuje prenos signálu; Alternatívne môže vstúpiť do bunky a viazať sa na proteíny prenosu signálu, čím ovplyvňuje fosforyláciu proteínov, defosforyláciu a iné modifikačné procesy, čo interferuje s prenosom signálu a amplifikáciou. Táto interferencia s bunkovými signálnymi dráhami môže viesť k bunkovej dysfunkcii, ktorá ovplyvňuje procesy, ako je bunková proliferácia, diferenciácia a apoptóza, čo môže mať nepriaznivé účinky na normálny vývoj a funkciu tkanív a orgánov.
Účinky na bunkový metabolizmus
Bunkový metabolizmus je všeobecný termín pre sériu chemických reakcií, ktoré prebiehajú v bunkách a poskytujú energiu a materiálny základ pre bunkové životné aktivity. 3XFLAG môže ovplyvňovať bunkové metabolické procesy, interferovať s produkciou bunkovej energie a syntézou látok. Môže napríklad ovplyvniť funkciu mitochondrií, ktoré sú hlavnými miestami pre aeróbne dýchanie a produkciu energie v bunkách. 3XFLAG môže meniť permeabilitu a potenciál mitochondriálnej membrány interakciou s proteínmi alebo lipidmi na membráne, čo ovplyvňuje funkciu mitochondriálneho dýchacieho reťazca a syntézu ATP,
čo vedie k nedostatočnému zásobovaniu buniek energiou. okrem tohoPeptid 3XFLAGmôže tiež interferovať s intracelulárnymi procesmi, ako je metabolizmus glukózy a metabolizmus lipidov, ovplyvňovať rovnováhu syntézy látok a rozkladu v bunkách a mať negatívny vplyv na normálne fyziologické funkcie buniek
Často kladené otázky
Čo je to 3X FLAG?
+
-
3X FLAG Peptide je syntetický peptid s 23 aminokyselinovými zvyškami. Motív Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp sa v peptide opakuje trikrát. Osem aminokyselín na C-konci tvorí klasickú sekvenciu FLAG (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
Aký je rozdiel medzi flag{0}}značkou a 3xflag?
+
-
Flag{0}}značka je jedna 8 aminokyselinová sekvencia bežne používaná pri imunoprecipitácii, Western blote a imunofluorescenčných aplikáciách. Naproti tomu značka 3x Flag- obsahuje 22 aminokyselín, čo jej dáva väčšiu afinitu k protilátkam proti-Flag, a preto je obzvlášť výhodná pre pracovné postupy čistenia proteínov.
Ako rozpustiť 3X FLAG?
+
-
Ak chcete pripraviť zásobný roztok, rozpustite v TBS (50 mM Tris-HCl, pH 7,4, so 150 mM NaCI) na koncentráciu 5 mg/ml. Alikvóty a skladujte pri teplote -20 stupňov. Opakované zmrazovanie a rozmrazovanie sa neodporúča.
Populárne Tagy: 3xflag peptid cas 402750-12-3, dodávatelia, výrobcovia, továreň, veľkoobchod, kúpiť, cena, hromadne, na predaj