Testolón (kvapalina RAD140)je selektívny modulátor androgénového receptora (SARM), pôvodne vyvinutý spoločnosťou Radius Health, na liečbu svalovej atrofie a osteoporózy. Ako nesteroidná zlúčenina RAD140 selektívne aktivuje androgénne receptory v kostrových svaloch a nervových tkanivách, pričom znižuje vedľajšie účinky na tkanivá, ako sú prostaty, koža a vlasové folikuly. Jeho anabolický účinok je podobný ako v prípade syntetických steroidov, ale s vyššou selektivitou receptorov a potenciálne lepšou bezpečnosťou.
Kvapalina RAD140 je kvapalná perorálna formulácia tejto zlúčeniny. Nadšenti fitness alebo športovci bežne používajú na zvýšenie svalovej hmoty a sily. Štúdie ukázali, že môže významne zvýšiť štíhlu telesnú hmotu a zároveň sa vyhnúť estrogénovi alebo progesterónovým vedľajším účinkom (ako je gynekomastia) spojené s tradičnými steroidmi. Jeho dlhodobá bezpečnosť však nebola úplne overená. Bežné vedľajšie účinky zahŕňajú mierne bolesti hlavy, únavu a potlačenie testosterónu. Vzhľadom na nedostatok klinického súhlasu je RAD140 v súčasnosti k dispozícii iba ako výskumná chemikália na obeh. Svetová antidopingová agentúra (WADA) ju uviedla ako zakázaná látka.
|
|
|
RAD140 COA
Základy chémie a syntetických procesov
Chemický základ
Testolón (kvapalina RAD140)je nesteroidný selektívny modulátor androgénového receptora (SARM), s molekulárnym vzorcom C₂₀h₁₆cln₅o₂ a molekulovou hmotnosťou 393,826 g/mol. Jeho chemická štruktúra obsahuje nasledujúce kľúčové vlastnosti:
Oxazolový prsteň
Ako základný rámec, táto štruktúra kruhu zvyšuje tuhosť molekuly prostredníctvom konjugačných účinkov a slúži ako väzbové miesto pre androgénové receptory, čím ju obdaruje schopnosťou selektívne aktivovať.
Skupina kyano a atóm chlóru
Skupina kyano (-CN) pôsobí ako silná skupina, ktorá odoberá elektrónmi a môže sa zúčastňovať na fotolýze reakcií prostredníctvom mechanizmu prenosu elektrónov, ale v syntéze sa používa ako kľúčová funkčná skupina na vedenie následných reakcií. Atóm chlóru (CL) stabilizuje distribúciu molekulárneho elektrónového oblaku prostredníctvom indukčného účinku.
Hydroxypropylový bočný reťazec
Poskytuje polárnu skupinu, zvyšuje intermolekulárnu vodíkovú väzbu, zlepšuje rozpustnosť (rozpustnosť v DMSO väčšia alebo rovná 90 mg/ml) a znižuje oxidačnú reakčnú aktivitu prostredníctvom priestorovej stérickej prekážky.
Proces syntézy
Syntéza Rad140 vyžaduje dokončenie viacerých organických reakcií. Základné kroky sú nasledujúce:
Suroviny:2- chloro -4- fluoro -3- metylbenzamid a HD-Thr-OH (hydroxytreonín).
Reakčné podmienky:Zmiešajte v DMSO, pridajte uhličitan draselný (k₂CO₃) ako bázu a miešajte reakciu po 75 stupňoch počas 24 hodín.
Produkt:Zlúčeniny 9 (čistota väčšia alebo rovná 95%) sa vytvárajú prostredníctvom acidifikácie, extrakcie a čistenia chromatografie stĺpcov.
Surovina:Zlúčenina 9 a 4- cyanobenzhydrazín.
Reakčné podmienky:Zmiešajte v THF, ochladte na -15 stupeň pod ochranou dusíka, pridajte hydroxybenzotriazol (HOBT), trietylamínu a karbodiimid hydrochlorid (EDCI) ako kondenzačné činidlá a miešajte reakciu cez noc.
Produkt:Generuje sa žltá zlúčenina 10 (výťažok 78%), čistená filtráciou, premytím a varením.
Ochrana siloxánov:Reagujte pomocou terc-butyl-dimetylchlorosilanu (TBDMSCI) a imidazol v dichlórmetáne, aby ste vytvorili medziprodukt 10a (výťažok 84%).
Jodinačná reakcia:Zavádzajte atómy jódu prostredníctvom nukleofilnej substitučnej reakcie s trihenylfosfínom, jódovými kryštálmi a trietylamínom, ktorý vytvára zlúčeninu 10b (výťažok 84%).
Detekcia:Odstráňte skupinu na ochranu siloxánu pomocou tetrabutylluoridového amónneho (TBAF) v stupni -40, aby ste získali surovú RAD140 (výťažok 68%) a vyčistite ju pomocou chromatografie silikagélu, aby ste získali bielu tuhú látku.
Kvapalina a optimalizácia stability
Testolón (kvapalina RAD140)Musí sa zachovať po dlhú dobu prostredníctvom rozpustenia rozpúšťadla a pridania stabilizátorov:
Výber rozpúšťadla:Všeobecne sa ako rozpúšťadlo používa vysoko čistota DMSO (väčšia alebo rovná 99,9%) alebo polyetylénglykol 400 (PEG400) na zabezpečenie úplného rozpustenia RAD140 (koncentrácia 10-20 mg/ml).
Pridanie stabilizátora:{{0}}. 1% kyselina askorbová (vitamín C) alebo butylovaný hydroxyanizol (BHA) sa pridá k inhibícii oxidačnej degradácie a 0,01% EDTA devodium sa pridá ako chelatačný činidlo, aby sa zabránilo degradácii katalytickej katalytickej iónov kovu.
Podmienky skladovania:
Vyhnite sa svetlu: Na balenie použite fľaše hnedého skla alebo hliníkové fólie na balenie, aby ste zabránili fotolýze.
Nízka teplota: Odporúča sa zmraziť pri -20 stupni na skladovanie. Stabilita pri teplote okolia 25 stupňov sa môže udržiavať iba 1 mesiac (obsah klesá menej ako 5%), zatiaľ čo v podmienkach mrazu sa môže predĺžiť na 2 roky.
Metódy kontroly a detekcie kvality
Vysokoúčinná kvapalná chromatografia (HPLC)
Použite stĺpec C18 (4,6 × 25 0 mm, 5 μm), s mobilnou fázou acetonitril-voda (obsahujúcej 0,1% kyseliny mravčej) pre eluciu gradientu, detekčná vlnová dĺžka 254 nm, retenčný čas RAD140 je približne 8,5 minúty, čistota potrebuje väčšie ako alebo rovnaké ako 98%.
Kvapalná chromatografia-hmotnostná spektrometria (LC-MS)
Pozitívny iónový iónový režim s elektrosprejom (ESI), vrchol molekulárneho iónu (M/z) je 394,1 ([M+H] ⁺), čo potvrdzuje presnosť molekulovej hmotnosti.
Jadrová magnetická rezonancia (NMR)
¹h NMR (400 MHz, DMSO-D₆) vykazuje charakteristické píky: δ 8,52 (S, 1H, kyanid meta-adjacent), protón 7,98 (d, 2H, benzénový kruhový protón), 4,21 (M, 1H, hydroxypropyl protón), čo overuje integritu štruktúry.
Kvapalina a optimalizácia stability
Konštrukcia kvapalného vzorca
Výber rozpúšťadla
DMSO (dimetylsulfoxid): Ako jadro rozpúšťadla môže DMSO úplne rozpustiť RAD14 0 (s koncentráciou až do 10-20 mg/ml), ale obsah vlhkosti je potrebné kontrolovať (menšie alebo rovné ako 0,1%), aby sa zabránilo hydrolytickým reakciám.
PEG400 (polyetylénglykol 400): Mierne rozpúšťadlo ako alternatíva k DMSO, vhodné pre používateľov citlivých na DMSO, ale s mierne nižšou rozpustnosťou (približne {{}}} mg/ml), je potrebné ho rozpustiť pomocou zahrievania ({{}}).
Zmiešaný rozpúšťadlo: DMSO a PEG400 sú zmiešané v pomere 1: 1, ktorý môže vyvážiť rozpustnosť a podráždenie, pričom znižuje viskozitu a zlepšuje plynulosť kvapky.
Stabilizátor
Antioxidant: Pridať 0. 1% kyselina askorbová (vitamín C) alebo butylovaný hydroxyanizol (BHA) na inhibíciu oxidačnej degradácie a predĺženie trvanlivosti na 18 mesiacov (pri teplote miestnosti).
Chelatačný agent: Pridať 0. 01% EDTA DESODIUM, chelatačné kovové ióny (napríklad Fe³⁺, Cu²⁺), aby sa zabránilo katalytickej degradácii.
Regulátor pH: Na reguláciu pH v rozsahu 4-6 použite roztok fosfátového pufra (PBS) alebo roztok citrátového pufra v rozsahu 4-6, čím sa zabráni štrukturálnemu poškodeniu v kyslých alebo zásaditých podmienkach.
Regulácia osmotického tlaku
Ak sa vzorec použije na injekciu alebo transdermálne podávanie, glycerol alebo glukóza by sa mal pridať na reguláciu osmotického tlaku do fyziologického rozsahu (280-310 MOSM/KG), čím sa znížilo podráždenie.
Stratégie optimalizácie stability
Zvýšenie stability svetla
Balenie tieňovania: Na blokovanie 99,9% ultrafialového svetla (UV-A/B) používajte fľaše hnedého skla alebo hliníkové fólie na balenie.
Stabilizátor svetla: Pridajte 0. 05% oxid titaničitý oxid (Tio₂) do vzorca, prostredníctvom fyzického tienenia a mechanizmov zachytávania voľných radikálov na zníženie fotolýze reakcií.
Regulácia teploty
Zadanie úložného priestoru: Odporúčajte zamrznutie pri -20 Stupeň na skladovanie, pričom stabilita sa udržiava iba 1 mesiac pri 25 stupňoch (obsah klesá menej alebo rovný 5%), zatiaľ čo podmienky zamrznutia sa môžu predĺžiť na 2 roky.
Test tepelnej stability: V 40 -stupňovom zrýchlenom teste je kvapalina RAD140 stabilná počas 6 mesiacov v DMSO (obsah väčší alebo rovný 95%), zatiaľ čo v PEG400 je stabilný iba 3 mesiace, čo si vyžaduje optimalizáciu pomeru vzorca.
Inhibícia oxidácie
Ochrana dusíka: Počas plnenia zavádzajte dusík na vylúčenie kyslíka, čím sa znižuje riziko oxidácie.
Synergizmus stabilizátora: Kyselina askorbová kombinovaná s BHA môže znížiť mieru degradácie oxidácie o 80%, čím sa trvanlivosť predĺži na 24 mesiacov.
Metódy kontroly a testovania kvality
Vysokoúčinná kvapalná chromatografia (HPLC)
Použite chromatografickú stĺpec C18 (4,6 × 25 0 mm, 5 μm), s mobilnou fázou acetonitrilovej vody (obsahujúcej 0,1% kyseliny mravčovej) pre eluciu gradientu s detekčnou vlnovou dĺžkou 254 nm. Čas retencie RAD140 je približne 8,5 minúty a čistota musí byť väčšia alebo rovná 98%.
Kvapalná chromatografia-hmotnostná spektrometria (LC-MS)
Detekcia prostredníctvom pozitívneho iónového režimu elektrosprejovej ionizácie (ESI), vrchol molekulárneho iónu (m/z) je 394,1 ([M+H] ⁺), čo potvrdzuje presnosť molekulovej hmotnosti.
Test zrýchlenia stability
Umiestnite v prostredí 4 0 /75% RH po dobu 6 mesiacov, pravidelne odoberte vzorky, aby ste zistili obsah a nečistoty. Ak obsah klesá menší alebo rovný 10% a nečistoty menšie alebo rovnajúce sa 1,0%, stabilita vzorca je kvalifikovaná.
Prípad optimalizácie priemyselných aplikácií
Vzorec biotechnologickej spoločnosti
Kompozícia: rad {{0}} mg/ml, dmso 7 0%, peg 400 20%, kyselina askorbová 0,1%, EDTA DESODIum 0,01%.
Údaje o stabilite: Uložené pri 25 stupňoch počas 12 mesiacov sa obsah znížil o 3,2%, nečistoty 0. 8%; Uložené v -20 stupni po dobu 24 mesiacov sa obsah znížil o 1,5%, nečistoty 0. 3%.
Vzorca
Zloženie: RAD 140 5 mg/g, polyakrylát-citlivý adhézny 80%, propylénglykol 10%, oxid titaničitý 5%.
Údaje o stabilite: Pri uložení 40 stupňov počas 3 mesiacov zostal transdermálny tok stabilný pri 12,5 ug/cm²/h a obsah sa znížil o menej ako 5%.
Kontrola a inšpekčné strany kvality
Kontrola kvalityTestolón (kvapalina RAD140)Malo by sa zamerať na tri základné aspekty: čistota, stabilita a kontrola nečistôt. V kombinácii s detekčnými technikami, ako je vysokoúčinná kvapalná chromatografia (HPLC), tekutá chromatografia-hmotnostná spektrometria (LC-MS) a jadrová magnetická rezonancia (NMR), zabezpečuje, aby produkt spĺňa požiadavky výskumu alebo aplikácie. Nasledujú špecifické metódy kontroly kvality a detekcie:
Testovanie čistoty
Vysokoúčinná kvapalná chromatografia (HPLC)
Metóda: Použite stĺpec C18 (4,6 × 25 0 mm, 5 μm), pričom mobilnou fázou je acetonitril-voda (obsahujúca 0,1% kyselinu mravčovú) pre gradient a detekčnú vlnovú dĺžku pri 254 nm.
Norma: Čas retencie RAD140 je približne 8,5 minút a čistota by mala byť väčšia alebo rovná 98%. Ak sa zistia vrcholy nečistoty, je potrebné ďalej analyzovať zdroj (napríklad syntetické vedľajšie produkty alebo degradačné produkty).
Aplikácia: Vhodný na rýchle skríning čistoty a je najbežnejšie používanou metódou pri kontrole kvality.
Kvapalná chromatografia-hmotnostná spektrometria (LC-MS)
Metóda: detegovaný pomocou režimu pozitívneho iónovej elektrosprejizácie (ESI), vrchol molekulárneho iónu (m/z) je 394,1 ([M+H] ⁺).
Štandard: Potvrďte presnosť molekulovej hmotnosti a vylučujte rušenie zo štrukturálnych analógov.
Aplikácia: Používa sa na presné overenie molekulovej hmotnosti v komplexných matriciach (napríklad formulácie obsahujúce stabilizátory).
Testovanie stability
Test zrýchlenej stability
Podmienky: Umiestnite 40 stupňov /75% RH (relatívna vlhkosť) počas 6 mesiacov a odoberte vzorky na pravidelné testovanie.
Štandard: Obsah znižuje menej alebo rovný 1 0%, nečistoty nižšie alebo rovné 1,0%. Ak stabilita nespĺňa štandard, musí sa optimalizovať vzorec (napríklad úpravy typu alebo koncentrácie stabilizátorov).
Aplikácia: Predpovedajte dlhodobú stabilitu produktu pri izbovej teplote a usmerňuje nastavenie trvanlivosti.
Test svetlej stability
Podmienky: Na ožarovanie vzoriek použite ultrafialové svetlo (UV-A/B), aby ste simulovali prostredie svetla.
Štandard: Obsah znižuje menej alebo rovný 5%, nečistoty menšie alebo rovné 0. 5%. Ak je fotolýza významná, použite svetlo odolné balenie (napríklad fľaše hnedého skla) alebo pridajte stabilizátory svetla (napríklad oxid titaničitý).
Aplikácia: Uistite sa, že produkt nie je ovplyvnený svetlom počas prepravy alebo skladovania.
Kontrola nečistôt
Detekcia zvyškov rozpúšťadla
Metóda: Zvyšky rozpúšťadla (ako je DMSO, PEG400) zvyšky pomocou plynovej chromatografie (GC).
Štandard: DMSO zvyšok menší alebo rovný {{0}}. 1%, zvyšok PEG400 menší alebo rovný 0,5%. Ak zvyšok presahuje štandard, optimalizujte proces čistenia (napríklad chromatografia alebo rekryštalizácia stĺpcov).
Aplikácia: Vyhnite sa rušeniu rozpúšťadiel na biologickú aktivitu alebo riziká toxicity.
Testovanie ťažkých kovov a mikrobiálnych limitov
Ťažké kovy: Na detekciu obsahu ťažkých kovov, ako je olovo (pb), arzén (AS) atď., Používajte induktívne spojenú plazmatickú hmotnostnú spektrometriu (ICP-MS), pričom štandard je menší alebo rovný {0. 005 mg/kg.
Mikroorganizmy: Podľa čínskeho farmakopoeia 2020, celkový počet bakteriálnych hĺbok <100 CFU/ml, plesne a kvasinky <10 CFU/ml.
Aplikácia: Uistite sa, že produkt spĺňa bezpečnostné normy a vyhýba sa rizikám infekcie alebo toxicity.
Štrukturálne overenie
Jadrová magnetická rezonancia (NMR)
Metóda: Detekcia charakteristických píkov pomocou NMR (400 MHz, DMSO-D₆).
Štandard: δ 8,52 (S, 1H, protón s kyanidom-adjacent), 7,98 (D, 2H, benzénový kruhový protón), 4,21 (M, 1H, hydroxyl-propylový protón). Ak je maximálna poloha alebo integrálna hodnota abnormálna, je potrebná opätovná syntéza alebo čistenie.
Aplikácia: Potvrďte integritu molekulárnej štruktúry a vylučujte izoméry alebo degradačné produkty.
Kontrola konzistencie šarže
Detekcia
Metóda: Vykonajte testovanie čistoty HPLC kľúčových medziproduktov (napríklad zlúčeniny 9, 10) v procese syntézy.
Štandard: stredná čistota väčšia alebo rovná 95%, čím sa zabezpečuje stabilita konečného produktu.
Aplikácia: Znížte rozdiely v dávkach-šarža prostredníctvom riadenia procesu.
Pozorovanie vzorkovania
Metóda: Zoberte vzorky každého dávkového produktu na pravidelné opakovanie (napríklad čistota testovania raz za 6 mesiacov).
Štandard: Vzorkovaný produkt by mal byť v súlade s počiatočnou kvalitou štandardu.
Aplikácia: Problémy s kvalitou sledovania a optimalizácia výrobných procesov.
Populárne Tagy: Testolone (Rad140 Liquid), dodávatelia, výrobcovia, továreň, veľkoobchod, nákup, cena, hromadný, na predaj