Epitalon(odkaz: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/epitalon-powder-cas-307297-39-8.html) je peptidová molekula, ktorá sa považuje za molekulu s dobrou biologickou aktivitou a potenciálnou liečivou hodnotou. V súčasnosti sa výskum epitalónového peptidu zameriava najmä na jeho aplikáciu ako prostriedku proti starnutiu.
Epitalon dokáže predĺžiť dĺžku telomér na koncoch chromozómov aktiváciou telomerázy, čím pozitívne ovplyvňuje proliferáciu a regeneráciu kmeňových buniek. Štúdie ukázali, že Epitalon môže významne inhibovať škodlivý oxidačný stres, znížiť poškodenie DNA a regulovať expresiu inzulínu podobného rastového faktora-1 (IGF-1) a nakoniec dosiahnuť účinok zníženia rýchlosti starnutie a predlžovanie životnosti.
Okrem toho má Epitalon aj imunomodulačné a neuroprotektívne účinky. Epitalon môže zvýšiť ľudskú imunitu a podporiť telo rozpoznávanie a odstraňovanie heterogénnych a vlastných antigénov. Okrem toho môže Epitalon tiež znížiť smrť neurónových buniek a neurodegeneráciu, čím sa dosiahnu neuroprotektívne účinky. Epitalon má tiež protirakovinové účinky a svoje účinky uplatňuje reguláciou bunkového cyklu, podporou bunkovej apoptózy a inhibíciou proliferácie nádorových buniek.
|
|
|
Epitalon je posilňovač tela, polypeptidová zlúčenina zložená zo štyroch aminokyselín alanínu (Ala), kyseliny glutámovej (Glu), asparagínu (Asp) a lyzínu (Lys). Metódy syntézy Epitalonu sa delia hlavne na chemickú syntézu a biosyntézu.
Metóda chemickej syntézy:
Epitalon je peptid zložený zo štyroch aminokyselín s molekulovým vzorcom C14H22N4O9. Epitalon môže podporovať uvoľňovanie ľudského rastového hormónu, čím pomáha oddialiť starnutie, zlepšiť spánok a posilniť imunitu.
1. Príprava reaktantu:
Reaktanty na syntézu Epitalonu zahŕňajú štyri aminokyseliny, alanín (Ala), kyselinu glutámovú (Glu), asparagín (Asp) a lyzín (Lys), ako aj acylačné činidlá, ako sú Boc-Lys-OtBu a Asp (OtBu). 2 a tak ďalej. Čistota týchto aminokyselín a činidiel musí byť vyššia ako 99 percent, inak bude ovplyvnená kvalita produktu.
2. Kroky chemickej syntézy
2.1 Syntéza anhydridu kyseliny alanín-4-hydroxymaslovej (Ala-Hyp):
First, mix alanine (Ala) and 4-hydroxybutyric anhydride (Hyp-OtBu), and carry out acylation reaction with an activator such as DCC, EDC, etc. under anhydrous environment to generate alanine-4-hydroxybutyric anhydride (Ala-Hyp). The final product was white crystals with >95 percentná čistota.
2.2 Syntéza Ala-Hyp-Glu-OtBu:
The synthesized alanine-4-hydroxybutyric anhydride and glutamic acid-butyrate (Glu-OtBu) were mixed in proportion, and then underwent multiple condensation reactions in anhydrous environment to obtain Ala-Hyp-Glu-OtBu. The final product is a white powder with a purity >95 percent
2.3 Syntéza epitalónu:
Pridajte Asp(OtBu)2 a Boc-Lys-OtBu do kondenzačného reakčného systému vo vopred určenom poradí a podstúpte viaceré kondenzačné reakcie, aby ste získali Epitalon. Postup je nasledovný:
a. Reakcia deprotekčnej skupiny:
Najprv sa odstránila ochranná skupina Asp(OtBu)2 a ochranná skupina Asp(OtBu)2 sa odstránila použitím hydroxidu sodného (NaOH) a kyseliny trichlóroctovej (TCA), aby sa vytvorili štruktúrne jednotky Asp a súčasne sa uvoľnil BuOt. Reakčný čas bol 1 hodina a teplota bola laboratórna teplota. Po reakcii vykonajte acidobázickú neutralizáciu, pridajte veľké množstvo nasýteného roztoku chloridu sodného, potom vyzrážajte etanolom a vysušte vo vákuu, čím sa získa Asp ako biela tuhá látka.
b. Kondenzačná reakcia:
Pridajte Asp a Ala-Hyp-Glu-OtBu do systému kondenzačnej reakcie a potom vykonajte viaceré kondenzačné reakcie, aby ste získali Epitalon. Tento proces je potrebné vykonať rôznymi spôsobmi liečby.
Prvý krok: odstráňte ochrannú skupinu Ala-Hyp:
Najprv sa Ala-Hyp-Glu-OtBu rozpustil v metanole, pridala sa kyselina trichlóroctová (TCA) a voda, aby sa odstránila ochranná skupina Hyp-OtBu použitá na ochranu aminoskupiny za vzniku Ala-Hyp-Glu-OH. Reakcia sa musí uskutočniť pri teplote miestnosti a na reakčný roztok sa po reakcii pôsobí NaOH, aby sa neutralizovala kyslosť.
Druhý krok: odstráňte ochrannú skupinu Glu-OtBu:
Potom sa po dôkladnom vysušení Ala-Hyp-Glu-OH zmiešal s Boc-Lys-OtBu, znova sa pridala kyselina trichlóroctová a voda a reakcia sa uskutočnila pri teplote miestnosti. Táto reakcia odstráni ochrannú skupinu Glu-OtBu za vzniku Ala-Hyp-Glu-Lys(Boc)-OtBu.
Tretí krok: odstráňte ochrannú skupinu Lys:
Nakoniec pridaním kyseliny trichlóroctovej, vody a metanolu sa odstráni ochranná skupina Boc-Lys-OtBu, čím sa vytvorí Epitalon. Reakcia sa musí uskutočniť pri teplote miestnosti a na reakčný roztok sa po reakcii pôsobí NaOH, aby sa neutralizovala kyslosť.
3. Analýza výsledkov:
Nakoniec sa získa produkt Epitalon, ktorý môže byť charakterizovaný a purifikovaný rôznymi analytickými metódami. Napríklad parametre, ako je čistota, nečistoty a hmotnosť, sa môžu určiť pomocou purifikačných metód, ako je Európsky liekopis (EP) alebo liekopis Spojených štátov amerických (USP).
4. Zhrnutie:
Epitalon je telový booster zložený zo štyroch aminokyselín alanínu, kyseliny glutámovej, asparagínu a lyzínu. Metóda chemickej syntézy Epitalonu zahŕňa hlavne metódu syntézy v tuhej fáze a metódu syntézy v kvapalnej fáze, ktoré potrebujú spojiť rôzne aminokyseliny prostredníctvom viacstupňových reakcií. Tento proces vyžaduje starostlivú kontrolu reakčných podmienok a purifikačných techník, aby sa zabezpečila vysoká čistota produktov.
Biosyntetická metóda:
Metóda biosyntézy spočíva v použití biokatalýzy mikroorganizmov alebo syntetických enzýmov na prípravu Epitalonu, vrátane fermentácie a enzýmovej katalýzy.
1. Fermentačná metóda: Fermentačná metóda je biosyntetická metóda využívajúca transgénny mikroorganizmus Escherichia coli na expresiu Epitalonu. Najprv vložte sekvenciu génu Epitalon do Escherichia coli a hromadne ju kultivujte na expresiu. Potom sa použijú rôzne čistiace techniky, ako je iónomeničová chromatografia a gélová chromatografia, aby sa nakoniec získali čisté produkty. Konkrétne kroky sú nasledovné:
1.1 Vyberte vhodné hostiteľské baktérie:
Aby bolo možné syntetizovať Epitalon, je potrebné vybrať vhodný hostiteľský kmeň na expresiu. Bežne používané hostiteľské baktérie zahŕňajú Escherichia coli (Escherichia coli), kvasinky (Saccharomyces cerevisiae) a huby (Aspergillus oryzae). Pri výbere hostiteľských baktérií je potrebné zvážiť, či hostiteľské baktérie majú schopnosť efektívne syntetizovať proteíny, či dokážu proteíny správne poskladať a modifikovať a či dokážu produkovať cieľové produkty s vysokým výťažkom.
1.2 Navrhnite génovú sekvenciu a klon:
Po výbere hostiteľských baktérií je potrebné vložiť sekvenciu génu Epitalon (vrátane sekvencií alanínu, kyseliny glutámovej, asparagínu a lyzínových báz) do hostiteľskej baktérie pomocou technológie rekombinácie DNA. Typicky je génová sekvencia klonovaná do expresného vektora, ktorý obsahuje elementy, ako sú promótorové a terminátorové sekvencie a selektovateľný antibiotický marker.
1.3 Expresia a čistenie:
Po dokončení klonovania sa expresný vektor transformuje do hostiteľskej baktérie a potom sa kultivuje. Počas kultivačného procesu hostiteľské baktérie syntetizujú Epitalon podľa génovej sekvencie v expresnom vektore. Akonáhle je produkt vyrobený v dostatočnom množstve, môže byť izolovaný z buniek rôznymi purifikačnými metódami a je získaný epitalon vysokej čistoty.
2. Enzýmom katalyzovaná metóda: Enzýmom katalyzovaná metóda je syntetizovať Epitalon spojením rôznych aminokyselín s rôznymi enzýmami. Napríklad L-glutamát-5-amináza sa používa na katalýzu reakcie glutamátu a butyrátu na syntézu Glu-OtBu. Potom použite L-asparaginázu na katalyzovanie kondenzačnej reakcie asparagínu a Ala-Hyp-Glu-OtBu na získanie Epitalonu.
Metódy syntézy Epitalonu sa delia hlavne na chemickú syntézu a biosyntézu. Chemická syntéza je v súčasnosti najčastejšie používanou metódou syntézy Epitalonu. Biosyntéza je príprava Epitalonu prostredníctvom biokatalýzy mikroorganizmov alebo syntetických enzýmov, vrátane fermentácie a enzýmovej katalýzy. Hoci biosyntetické metódy majú veľký potenciál, je stále potrebný ďalší výskum a optimalizácia. Epitalon je potenciálny liek so širokými aplikačnými perspektívami, ktorý možno použiť v oblasti anti-agingu, imunitnej regulácie, neuroprotekcie a liečby rakoviny. Zároveň môže byť Epitalon použitý aj ako zdravá výživa a produkt zdravotnej starostlivosti, ktorý pomáha spotrebiteľom odolávať starnutiu, zvyšuje imunitu a znižuje riziko chorôb. Hoci je výskum Epitalonu stále v plienkach, verí sa, že s hĺbkovým výskumom jeho mechanizmu a funkcie sa Epitalon stane dôležitým liekom a produktom zdravotnej starostlivosti.