IPTG, CAS 367-93-1, chemická štruktúra zložená z izopropylu – Pozostáva z D-tiogalaktozidových a fosfátových skupín. Medzi nimi - D-tiogalaktozid je analóg galaktózy, v ktorej atóm síry nahrádza atóm kyslíka. Táto špeciálna glykozidová štruktúra umožňuje IPTG viazať sa na DNA a indukovať génovú expresiu. IPTG má nízku rozpustnosť vo vode, ale môže sa dobre rozpustiť vo fyziologickom roztoku a fosfátovom pufri. Je kyslý s hodnotou pKa 4,5, čo súvisí s fosfátovou skupinou v jeho molekulárnej štruktúre. Nie je ľahké kryštalizovať v čistej vode, ale môže vytvárať kryštály v roztokoch s vysokou koncentráciou alebo po pridaní iných zlúčenín. Vďaka svojej schopnosti indukovať expresiu bakteriálnych proteínov je IPTG citlivý na určité mikroorganizmy. Napríklad niektoré baktérie môžu prestať rásť alebo zomrieť po vystavení IPTG.
(Odkaz na produkt 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1}.html ）
(Odkaz na produkt 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-powder-cas-367-93-1.html ）
Enzymatická syntéza IPTG je metóda, ktorá využíva enzýmy na katalýzu reakcie galaktózy a uridíntrifosfátu za vzniku izopropylových skupín- - Metóda pre D-tiogalaktozid. Nasledujú podrobné kroky a chemické rovnice tejto metódy:
1. Prípravné práce:
Pripravte si potrebné činidlá a vybavenie vrátane galaktózy, uridíntrifosfátu, enzýmov, pufrov, reakčných nádob, regulátorov teploty atď.
Do reakčnej nádoby pridajte v určitom pomere galaktózu a uridíntrifosfát.
Pridajte vhodné množstvo enzýmu a pufra na udržanie stability pH reakčného systému.
Vložte reakčnú nádobu do regulátora teploty a nastavte vhodnú reakčnú teplotu.
2. Reakčný proces
2.1 Reakčný systém rovnomerne premiešajte pri vhodnej teplote.
2.2 Udržujte stabilitu teploty a pH reakčného systému a pokračujte v miešaní.
2.3 Odber vzoriek a testovanie izopropylu v pravidelných intervaloch- - Výroba D-tiogalaktozidu.
2.4 Upravte dávkovanie enzýmu a reakčný čas na základe výsledkov testu, aby ste dosiahli najlepšiu produkciu D-tiogalaktozidu izopropylskupiny- -.
3. Chemická rovnica
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + UDP → C8H6Br4O2 + C10H15N5O10P2 + C3H7N
Medzi nimi ATP predstavuje adenozíntrifosfát, UDP predstavuje uridíndifosfát a Pi predstavuje anorganický fosfor. Táto chemická rovnica predstavuje tvorbu izopropylových skupín z galaktózy a uridíntrifosfátu pôsobením enzýmov - - D-tiogalaktozid a ADP, ako aj Pi.
4. Separácia a čistenie
Po dokončení reakcie sa reakčný roztok prefiltruje alebo odstredí, aby sa odstránila nezreagovaná galaktóza, uridíntrifosfát a iné nečistoty.
Použitie vhodných separačných a purifikačných techník, ako je iónová výmena, chromatografia atď., na ďalšie čistenie izopropyl- -D-tiogalaktozidu.
Vykonajte testovanie kvality, ako je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia, hmotnostná spektrometria atď., aby ste sa uistili, že kvalita produktu spĺňa požiadavky.
5. Zhrnutie
Metóda enzymatickej syntézy IPTG má vysokú selektivitu, výťažok a čistotu, ako aj šetrnosť k životnému prostrediu a vysokú bezpečnosť. Pri tejto metóde má typ, koncentrácia, hodnota pH, teplota a ďalšie podmienky enzýmu významný vplyv na výsledky reakcie a je potrebná presná kontrola a úprava. Okrem toho sú separačné a purifikačné kroky tiež kľúčové na zabezpečenie kvality a čistoty produktu. V praktickej prevádzke by sa úpravy a optimalizácie mali vykonávať podľa konkrétnych okolností, aby sa dosiahla najlepšia produkcia a kvalita D-tiogalaktozidu zo skupiny izopropyl- -.
Viaczložková reakčná metóda IPTG je reakcia, ktorá využíva účasť viacerých zložiek na syntézu izopropyl- - metódy pre D-tiogalaktozid. Nasledujú podrobné kroky a chemické rovnice tejto metódy:
1. Prípravné práce
Pripravte si potrebné činidlá a vybavenie vrátane galaktózy, uridíntrifosfátu, adenozíntrifosfátu, tiosíranu sodného, enzýmov, pufrov, reakčných nádob, regulátorov teploty atď.
Pridajte galaktózu, uridíntrifosfát, adenozíntrifosfát a tiosíran sodný v určitom pomere do reakčnej nádoby.
Pridajte vhodné množstvo enzýmu a pufra na udržanie stability pH reakčného systému.
Vložte reakčnú nádobu do regulátora teploty a nastavte vhodnú reakčnú teplotu.
2. Reakčný proces
2.1 Reakčný systém rovnomerne premiešajte pri vhodnej teplote.
2.2 Udržujte stabilitu teploty a pH reakčného systému a pokračujte v miešaní.
Počas reakčného procesu je potrebné venovať pozornosť pozorovaniu priebehu reakcie, včasnej úprave množstva enzýmu a reakčného času, aby sa dosiahla najlepšia produkcia D-tiogalaktozidu izopropylskupiny- -.
3. Chemická rovnica
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + C9H14N2O12P2 + C10H15N5O10P2 → C8H6Br4O2 + C3H7N
Medzi nimi ATP predstavuje adenozíntrifosfát, UDP predstavuje uridíndifosfát, ADP predstavuje adenozíndifosfát a Pi predstavuje anorganický fosfor. Táto chemická rovnica predstavuje tvorbu izopropylových skupín z galaktózy, uridíntrifosfátu a adenozíntrifosfátu pôsobením enzýmov - - D-tiogalaktozid a Pi.
4. Separácia a čistenie
Po dokončení reakcie sa reakčný roztok prefiltruje alebo odstredí, aby sa odstránila nezreagovaná galaktóza, uridíntrifosfát, adenozíntrifosfát a iné nečistoty.
Použitie vhodných separačných a purifikačných techník, ako je iónová výmena, chromatografia atď., na ďalšie čistenie izopropyl- -D-tiogalaktozidu.
Vykonajte testovanie kvality, ako je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia, hmotnostná spektrometria atď., aby ste sa uistili, že kvalita produktu spĺňa požiadavky.
5. Zhrnutie
Viaczložková reakčná metóda IPTG využíva výhody viacerých zložiek, ktoré sa spolu zúčastňujú reakcie, s vysokou selektivitou, výťažkom a čistotou. Pri tejto metóde sa okrem hlavných surovín ako galaktóza, uridíntrifosfát a enzýmy pridávajú aj pomocné zložky ako adenozíntrifosfát a tiosíran sodný na podporu reakcie a zlepšenie kvality produktu. Okrem toho sú separačné a purifikačné kroky tiež kľúčové na zabezpečenie kvality a čistoty produktu. V praktickej prevádzke by sa úpravy a optimalizácie mali vykonávať podľa konkrétnych okolností, aby sa dosiahla najlepšia produkcia a kvalita D-tiogalaktozidu zo skupiny izopropyl- -. Zároveň by sa mala venovať pozornosť kontrole reakčných podmienok, ako je teplota, hodnota pH a dávkovanie enzýmu, aby sa dosiahol najlepší reakčný účinok.