Fluoresceín izotiokyanát CAS 27072-45-3

Fluoresceín izotiokyanátOranžová červená, izotiokyanátová fluorescenčná žltá, izotiokyanátová fluorescenčná červená, izotiokyanátová fluoresceín Izomér I, 5- izotiokyanátový fluoresceín. Žltý prášok. Je hygroskopický. Môže sa viazať s rôznymi proteínmi protilátky a protilátka po väzbe nestráca špecificitu väzby s určitým antigénom. Stále má silnú zelenú fluorescenciu v alkalickom roztoku. Po pridaní kyseliny sa vyzráža a fluorescencia zmizne. Je mierne rozpustný v acetóne, éteru a ropnom éteru. Je to biochemické činidlo, ako aj lekárske diagnostické liečivo, ktoré dokáže rýchlo diagnostikovať choroby spôsobené baktériami, vírusmi, parazitmi atď. Okrem toho sa môže viazať s rôznymi proteínmi protilátok a protilátka po väzbe nestráca špecifickosť väzby s určitým antigénom a stále existuje silná zelená fluorescencia v alkalovom riešení. Po pridaní kyseliny sa vyzráža a fluorescencia zmizne a je mierne rozpustná v acetóne, éteru a ropnom éteru.

Študovať vlastnostifluoresceín izotiokyanátZnačený inzulín pre afinovanú želatínu a jej aplikáciu pri podávaní nosnej sliznice:

Pod podmienkou žiadneho vonkajšieho emulgátora sa vodný roztok aminátovej želatíny rozptýlil v olivovom oleji a prostredníctvom procesov emulgácie, dehydratácie a krížového prepojenia sa pripravil nový typ pozitívne nabitých gélových mikrosfér, afinovaných želatínových mikrosfér. Priemerná veľkosť častíc mikrosfér je 40-50 μm. Veľkosť je rovnomerne distribuovaná. Sušené mikrosféry môžu absorbovať asi 20 -krát svojej vlastnej hmotnosti vody za vzniku hydrogélov. Aminoované želatínové mikrosféry majú vyšší obsah amino -želatínových mikrosfér. Sú pozitívne nabité v roztoku destilovanej vody a fosfátového pufra a potenciál Zata v destilovanej vode je 41,5 mV.

So zvýšením koncentrácie glutaraldehydu alebo rozšírením času zosieťovania reakcie sa obsah aminostroje v mikrosférach znížil. Avšak bez ohľadu na podmienky zosieťovania majú afinované želatínové mikrosféry pripravené touto metódou vyšší primárny obsah amino -amino -amino -mikrosfér. Aminoované želatínové mikrosféry sa môžu rýchlo degradovať (<1h) in the presence of trypsin, but slowly (>20h) v pepsínovom a kyslom založení. Interakcia medzi afinovanými želatínovými mikrosférami a mucínom je silnejšia ako interakcia medzi želatínovými mikrosférami. Vysoká pozitívna hustota náboja afinovaných želatínových mikrosfér je hlavným dôvodom jej silnej interakcie s mucínom. Bioadhézne vlastnosti aminovaných želatínových mikrosfér sa študovali metódou fluorescenčného značenia a technológiou degradácie enzýmov in vitro, pomocou modelu izolovaného perfúzneho premývacieho premývania žalúdka a experimentu in vivo u potkanov.

The results showed that under the same experimental conditions, the number of aminated gelatin microspheres retained in the isolated rat stomach was more than that of gelatin microspheres, and the type of irrigation solution (artificial gastric juice or PH7 human phosphate buffer) had no significant effect on the gastric retention of microspheres, which indicated that the electrostatic interaction between the microspheres and gastric mucus was not the decisive factor for the gastric Zadržanie mikrosfér v tomto modeli. V experimente sa však zistilo, že množstvo afinovaných želatínových mikrosfér zadržaných v izolovanom žalúdku potkanov sa znížilo so zvýšením koncentrácie zosieťovacieho činidla glutaraldehydu pri príprave mikrosfér, čo naznačuje, že žalúdočná slzná adhézia alebo afinovaná gelatínová mikrosféra môže byť ovplyvnená aminosférovým obsahom na povrchu makosféry alebo makroféry.

Experimentálne výsledky in vivo u potkanov ukázali, že amino želatínové mikrosféry mali lepšiu slizničnú adhéziu ako želatínové mikrosféry. U zdravých potkanov sa skúmali účinky aminovanej želatíny na nazálnu absorpciu glukánu a inzulínu. Výsledky ukázali, že 0. 2% (WN) aminoselatína by mohla významne podporovať absorpciu fluoresceínového izotiokyanat glukánu z nosovej sliznice potkana s biologickou dostupnosťou 23,8%. Po intranazálnom podaní 10 IU inzulínového fosfátového pufra obsahujúceho 0 2% (W/V) aminoselatína bola hladina glukózy v krvi významne nižšia ako hladina inzulínového fosfátového pufra.

Fluoresceín izotiokyanát(FITC), ako klasické fluorescenčné činidlo na označovanie, sa stal nevyhnutným nástrojom v oblasti biológie, medicíny a materiálových vedy kvôli vysokému kvantovým výnosom, vynikajúcej fotostabilite a dobrej biologickej kompatibilite.

Biomolekulárne markery: Presné sledovanie proteínov po nukleové kyseliny

 

Skupina izotiokyanátov (- n=C=s) FITC môže podstúpiť kovalentné reakcie s aktívnymi skupinami, ako sú amino a tiolové skupiny v biomolekulách, čím sa vytvárajú stabilné fluorescenčné komplexy. Táto charakteristika z neho robí preferované činidlo pre značenie proteínov, nukleovej kyseliny a peptidov.
Značenie proteínov a funkčný výskum
FITC dosahuje špecifické značenie väzbou na lyzínové zvyšky proteínov, ako sú protilátky a lektíny. Napríklad v imunofluorescenčných experimentoch sa môžu protilátky značené FITC viazať na antigény bunkového povrchu a kvantitatívne analyzovať hladiny expresie antigénu prostredníctvom fluorescenčnej mikroskopie alebo prietokovej cytometrie. Experimentálne údaje ukazujú, že intenzita fluorescencie konjugátu FITC IgG sa lineárne týka koncentrácie antigénu a citlivosť detekcie môže dosiahnuť hladinu Danak. Okrem toho sa proteíny značené FITC môžu použiť aj na štúdie interakcie proteínov, ako je analýza proteínových konformačných zmien prostredníctvom technológie fluorescenčnej rezonančnej energie (FRET).

 

Značenie nukleových kyselín a molekulárna hybridizácia
FITC môže byť chemicky modifikovaný tak, aby označil 5 'alebo 3' koniec nukleových kyselín pre fluorescenciu in situ hybridizačnej technológie (FISH). Vo výskume rakoviny sa sondy značené FITC môžu špecificky viazať na chromozomálne abnormálne oblasti, aby pomohli pri diagnostike hematologických chorôb, ako je leukémia a lymfóm. Napríklad sondy FITC zacielené na fúzne gény BCR-ABL môžu vykazovať žlté fluorescenčné signály v jadrách interfázových buniek s mierou presnosti viac ako 95%.
Označovanie peptidov a dodávanie liečiva
Peptidy označené FITC hrajú dôležitú úlohu v systémoch dodávania liečiv. Ako príklad berie M2PEP-FITC, táto molekula sa skladá z zacieľujúceho peptid M2PEP a fluorescenčnej skupiny FITC, ktorá môže špecificky rozpoznať receptory povrchových buniek nádorových buniek a dosiahnuť cielené dodávanie liečiva. Pokusy ukázali, že akumulácia lipozómov značených M2PEP-FITC v nádorových tkanivách je 3,2-násobok voľných liekov, čo významne zlepšuje terapeutickú účinnosť a znižuje vedľajšie účinky.

Lekárska diagnostika: od detekcie patogénov po včasné skríning nádorov

 

Vďaka fluorescenčným vlastnostiam FITC je „zlatý štandard“ v oblasti diagnostiky in vitro, ktorý sa bežne používa v technikách, ako je imunochromatografia, prietoková cytometria a ELISA.
Rýchla detekcia patogénov
Protilátky označené FITC sa môžu použiť na rýchlu diagnostiku bakteriálnych, vírusových a parazitických infekcií. Napríklad pri diagnostike malárie sa protilátky proti malárii označené FITC viažu na krvné náter pacienta a zelený fluorescenčný signál parazitu sa pozoruje fluorescenčnou mikroskopiou. Čas detekcie sa skráti z 2 hodín tradičnými metódami na 15 minút a citlivosť dosahuje 98%. Okrem toho sa na detekciu nukleových kyselín respiračného vírusu môžu tiež použiť sondy nukleových kyselín označených FITC, ako je napríklad gén SARS-Cov {5}}, so špecifickosťou 99,2%.

 

Nádorové markery
V prietokovej cytometrii,fuoresceín izotiokyanátZnačené protilátky anti-CD45 môžu odlíšiť bunky leukémie od normálnych krviniek. Údaje ukazujú, že pozitívna miera protilátky CD34 označenej FITC v diagnostike akútnej myeloidnej leukémie (AML) je 85%, čo je o 20% vyššia ako tradičné morfologické vyšetrenie. Pokiaľ ide o skoré skríning nádorov, detekčná technológia Cirkulujúcich cirkulujúcich nádorových buniek (CTC) môže zachytiť nádorové bunky v extrémne nízkych koncentráciách v periférnej krvi, čím poskytuje novú metódu včasnej diagnostiky solídnych nádorov, ako je rakovina prsníka a rakovina pľúc.
Diagnostika autoimunitných chorôb
V technológii ELISA sa môžu autoprotilátky označené FITC (ako sú anti jadrové protilátky a protilátky proti dvojitým uväzneným DNA) na diagnostiku chorôb, ako je systémový lupus erythematosus (SLE). Pokusy ukázali, že FITC-ELISA má citlivosť 92% a špecifickosť 95% na detekciu anti SM protilátok, čo je výrazne lepšie ako tradičné imunofluorescenčné metódy.

Výskum biológie buniek: od subcelulárnej štruktúry po dynamické sledovanie

 

Priepustnosť buniek a nízka toxicita FITC z neho robí ideálny nástroj na zobrazovanie buniek, ktorý sa bežne používa pri lokalizácii organel, pozorovaní delenia buniek a výskume apoptózy.
Značenie a dynamické pozorovanie buniek a dynamické pozorovanie
Mitochondriálne sondy označené FITC (ako napríklad MitoTracker Green) sa môžu špecificky viazať na mitochondriálny membránový potenciál a monitorovať mitochondriálne morfologické zmeny v reálnom čase. V neuronálnom výskume môžu proteínové protilátky s mikrotubuly značenými FITC vykazovať dynamické rozšírenie axónových rastových kužeľov, čo odhaľuje mechanizmus nervového vývoja. Okrem toho sa na štúdium autofágových procesov môžu použiť aj lyzozómové sondy označené FITC (Lysotracker Green), čím sa kvantifikuje počet autofagozómov zmenami intenzity fluorescencie.

 

Analýza bunkového cyklu a apoptózy
V prietokovej cytometrii sa propidium jodid označený FITC (PI) môže viazať na DNA a rozlišovať rôzne štádiá bunkového cyklu (g {{}}/g1, s, g2/m) intenzitou fluorescencie. Experimentálne údaje ukazujú, že citlivosť metódy dvojitého farbenia FITC-PI na detekciu bunkovej apoptózy je 98%, čo je o 30% vyššia ako tradičná metóda farbenia Trypan Blue. Okrem toho sa sondy annexínu V značené FITC môžu špecificky viazať na fosfatidylserín exponovaný na povrchu apoptotických buniek, čím sa dosiahne presná identifikácia skorých apoptotických buniek.
Výskum migrácie a invázie buniek
V experimentoch Transwell môžu bunky značené FITC monitorovať migračný proces v reálnom čase. Napríklad pri štúdiu metastázy nádoru je miera migrácie buniek rakoviny prsníka (MCF -7) prostredníctvom lepidla matrice pozitívne korelovaná so schopnosťou invázie a poskytuje kvantitatívne ukazovatele pre skríning anti-tumorových liekov.

Vývoj liečiva: od cieľovej validácie po hodnotenie účinnosti

 

FITC hrá vo vývoji liečiv viaceré úlohy vrátane validácie cieľa, hodnotenia systému dodávania liečiva a farmakokinetických štúdií.
Zacieliť na validáciu a mechanizmus akčného výskumu
Na overenie cieľov liečiva sa môžu použiť inhibítory malých molekúl FITC. Napríklad inhibítory EGFR značené FITC (ako napríklad gefitinib) môžu demonštrovať väzbu liekov na receptory EGFR na povrchu nádorových buniek, čím kvantifikujú väzbovú afinitu (hodnota KD) prostredníctvom intenzity fluorescencie. Okrem toho sa siRNA značená FITC môže použiť aj na štúdium účinnosti umlčania génov, čo poskytuje základ pre interferenčnú terapiu RNA.

Hodnotenie systému dodávania liečiva
Nanočastice označené FITC (ako sú lipozómy a polymérne mikrosféry) môžu monitorovať distribučné a uvoľňovacie správanie liekov in vivo v reálnom čase.

 

Pokusy ukázali, že akumulácia PEGylovaných lipozómov označených FITC v nádorových tkanivách je 2,8 -násobok voľného liečiva a fluorescenčný signál môže trvať 24 hodín, čo poskytuje vizuálne údaje na optimalizáciu systémov dodávania liečiva.

Farmakokinetické a toxikologické štúdie
Molekuly liečiva označené FITC môžu byť kvantitatívne analyzované na ich absorpciu, distribúciu, metabolizmus a vylučovanie (ADME) in vivo prostredníctvom fluorescenčnej zobrazovacej technológie. Napríklad intenzita fluorescencie antibiotík označených FITC (ako je vankomycín) v obličkách lineárne súvisí s koncentráciou liečiva, čo poskytuje základ pre optimalizáciu dávkovania liečiva. Testy cytotoxicity označené FITC navyše môžu tiež vyhodnotiť poškodenie liečiv normálnym bunkám a usmerňovať hodnotenia bezpečnosti.

Materiálová veda: od senzorov po fluorescenčné sondy

 

Vďaka charakteristikám fluorescenčnej odozvy FITC je jedinečne použiteľná v oblasti vedy o materiáloch vrátane vývoja senzorov pH, teplotných senzorov a sond kovových iónov.
Fluorescenčný snímač reagujúci na pH
Intenzita fluorescenciefluoresceín izotiokyanát is significantly affected by the pH value of the solution. In weakly acidic environments (pH 5.0-6.5), protonation of FITC groups leads to increased fluorescence intensity; Under alkaline conditions (pH>8. 0), fluorescencia je ochladená. Na základe tejto charakteristiky sa môžu Nanočastice modifikované FITC použiť na monitorovanie fluktuácií intracelulárnej kyseliny. Napríklad intenzita fluorescencie komplexu biliribínu FITC v mikroprostredí nádoru je 2,3 -násobok intenzity normálneho tkaniva, čo poskytuje novú metódu diagnostiky nádoru.

 

Fluorescenčná sonda reagujúca na teplotu
Životnosť fluorescencie zmeny FITC s teplotou. Pri podmienkach nízkej teploty (4 stupňa) sa fluorescenčná životnosť polymérnych mikrosfér označených FITC predĺži na 5,2 nanosekundov, čo je 1,8 -krát vyššia ako teplota miestnosti (25 stupňov). Táto charakteristika z neho robí ideálny nástroj na štúdium procesov fázového prechodu a kryokonzervácie buniek.
Detekčná sonda kovu
FITC významne znižuje intenzitu fluorescencie v kombinácii s kovovými iónmi, ako sú Cu ² ⁺ a Hg ² ⁺, čo je vhodné na monitorovanie životného prostredia. Napríklad nanočastice modifikované silikagélom Modifikované FITC majú detekčný limit 0. 1 nm pre Hg ² ⁺ vo vode, čo je 100 -krát vyššia ako tradičná atómová absorpčná spektroskopia.

Poľnohospodárstvo a hospodárske zvieratá: od detekcie patogénov po zlepšenie rozmanitosti

 

Aplikácia FITC v poľnohospodárskom poli sa postupne rozširuje, vrátane detekcie vírusu rastlín, diagnostiky chorôb zvierat a identifikácie čistoty odrody.
Rýchla detekcia rastlinných vírusov
Na detekciu vírusu tabakovej mozaiky (TMV), vírusu mozaiky uhorky (CMV) a ďalších vírusov vírusov (TMV), vírusu tabakovej mozaiky (TMV) a ďalších vírusov vírusov (TMV) a iných vírusov. Pokusy ukázali, že citlivosť FITC-ELISA na detekciu TMV je 0. 1 ng/ml, čo je 10-krát vyššia ako tradičné sérologické metódy. Okrem toho sa na detekciu exogénnych génov v geneticky modifikovaných plodinách, ako napríklad BT gény rezistentné na hmyz, môžu sa tiež použiť sondy nukleových kyselín označených FITC, ako sú napríklad BT gény rezistentné na hmyz.

Diagnostika chorôb zvierat
Protilátky označené FITC sa môžu použiť na detekciu vírusu ošípanej horúčky (CSFV), vírusu vtáčej chrípky (AIV) a ďalších vírusov.

 

Pri diagnostike horúčky ošípaných sa protilátky proti CSFV značené FITC viažu na rezy tkanív a pozorujú distribúciu vírusu prostredníctvom fluorescenčnej mikroskopie, čím sa znižuje čas detekcie z tradičných metód 3 dní do 6 hodín. Okrem toho sa na detekciu T buniek špecifických pre patogény v krvnej krvi a vyhodnotenie intenzity imunitnej reakcie sa môže použiť aj na detekciu T buniek špecifických pre patogény.
Identifikácia čistoty rozmanitosti
Na identifikáciu čistoty odrôd plodín sa môžu použiť DNA sondy označené FITC. Napríklad sonda FITC zameraná na gén rezistencie na rezistenciu na ryžové ochorenie môže presne rozlišovať medzi homozygotmi a heterozygotmi v hybridných semenách ryže s presnosťou identifikácie čistoty 99,5%. Okrem toho sa môžu molekulárne markery SSR označené FITC použiť aj na analýzu genetickej diverzity plemien zvierat a hydiny, čo poskytuje vedecký základ pre šľachtenie.

Syntéza FITC: 4- nitroftalická anhydrid (pozri C8H3NO5, [{{}}]) reaguje s resorcinolom pri {195-200 stupni C pre 10h, cyklizuje sa do 3 'nitrofluoresceínu a 4' - nitrofluityl. Anhydrid, hydrolyzes s roztokom etanolu hydroxidu nasýteného sodným, 4 "nitrofluoresceín.fluoresceín izotiokyanát.

FITC Pure Product je žltý alebo oranžový kryštalický prášok, ktorý je ľahko rozpustný vo vodnom a alkoholovom rozpúšťadle. Existujú dva izoméry, medzi ktorými je izomér typu I lepší v účinnosti, stabilite a väzbe proteínov. Molekulová hmotnosť FITC je 389,4, maximálna absorpčná vlnová dĺžka je 490 až 495 nm a maximálna emisná vlnová dĺžka je 520 ~ 530 nm, ktorá vykazuje jasne žltú zelenú fluorescenciu. FITC je možné uchovávať mnoho rokov na chladných, tmavých a suchých miestach a je najčastejšie používaným fluoresceínom. Jeho hlavnou výhodou je, že ľudské oko je citlivejšie na žltá zelená a zelená fluorescencia vo vzorke sekcie je zvyčajne menšia ako červená.

Populárne Tagy: fluoresceín izotiokyanát CAS 27072-45-3, dodávatelia, výrobcovia, továreň, veľkoobchod, nákup, cena, objem, na predaj