Janus Green B, anglický názov Janus Green, molekulový vzorec C30H31ClN6, CAS 2869-83-2, je zelený tuhý prášok pri izbovej teplote a tlaku. Zdá sa, že je rozpustný vo vode, ale mierne rozpustný v alkoholových organických rozpúšťadlách. Má vysokú rozpustnosť vo vode, najmä keď je rozpustený v horúcej vode a javí sa ako modrý. Je tiež mierne rozpustný v alkoholových rozpúšťadlách. Táto vlastnosť mu umožňuje rýchlo difundovať a farbiť sa v biologických vzorkách. Je to špecifický živý farbiaci prostriedok, ktorý možno použiť na farbenie mitochondrií naživo, farbenie húb a prvokov, farbenie rezov embryí, ako aj na redoxné indikátory a aditíva na galvanizáciu medi. Má dobré uplatnenie v oblastiach základného výskumu, ako je biochémia a fluorescenčné farbivá. Jeho molekulárna štruktúra obsahuje azofarbivá, čo z neho robí účinné organické farbivo. Vďaka kladnému náboju v jeho molekulárnej štruktúre má tiež určitú aplikačnú hodnotu v materiáloch na galvanické pokovovanie.
|
|
|
|
Chemický vzorec |
C30H31ClN6+ |
|
Presná hmotnosť |
510 |
|
Molekulová hmotnosť |
511 |
|
m/z |
510 (100.0%), 511 (32.4%), 512 (32.0%), 513 |
|
Elementárna analýza |
C, 70,51; H, 6,11; N, 16,44; Cl, 6,94 |
Janus Green B, ako dôležité biologické farbivo, má široké uplatnenie vo viacerých oblastiach.
1. In vivo farbenie mitochondrií
Najznámejšie-použitie je ako živé farbivo špecifické pre mitochondrie. Mitochondrie sú "energetické továrne" v bunkách, zodpovedné za produkciu energetických molekúl, ako je ATP, na udržanie bunkových životných aktivít. Môže špecificky zafarbiť mitochondrie, takže pod mikroskopom s vysokým-výkonom vyzerajú modro-zeleno, zatiaľ čo cytoplazma je takmer bezfarebná. Táto charakteristika farbenia umožňuje výskumníkom jasne pozorovať distribúciu, morfológiu a množstvo mitochondrií v bunkách, čo má veľký význam pre štúdium funkcie, metabolizmu a vzťahu s chorobami mitochondrií.
2. Farbenie húb a prvokov
Okrem farbenia mitochondrií sa môže použiť aj na farbenie húb a prvokov. Huby a prvoky sú dôležitými objektmi biologického a lekárskeho výskumu a ich morfológia, štruktúra a fyziologické charakteristiky sú kľúčové pre pochopenie životných procesov a mechanizmov chorôb. Jeho farbiace vlastnosti uľahčujú pozorovanie a identifikáciu týchto drobných organizmov pod mikroskopom, čo poskytuje silnú podporu súvisiacemu výskumu.
3. Farbenie rezov embryí
Vo výskume vývojovej biológie a embryológie je farbenie rezov embryí dôležitým prostriedkom na pochopenie procesu vývoja embrya a štrukturálnych zmien. Môže sa použiť na farbenie rezov embryí, aby pomohla výskumníkom pozorovať a analyzovať štruktúru bunkového tkaniva a morfologické charakteristiky embryí v rôznych vývojových štádiách. To má veľký význam pre pochopenie regulačných mechanizmov embryonálneho vývoja, výskytu genetických chorôb a problémov reprodukčného zdravia.
4. Redoxný indikátor
Má tiež funkciu indikátora oxidácie-redukcie. Pri chemických reakciách sú oxidačné a redukčné stavy látok často sprevádzané zmenami farby. V rôznych redoxných stavoch bude vykazovať rôzne farby, a preto môže byť použitý ako indikátor pre redoxné reakcie. Vďaka tejto vlastnosti má potenciálnu aplikačnú hodnotu v oblastiach, ako je chemická analýza, monitorovanie životného prostredia a potravinársky priemysel.
Vychádzajúc zo 4-amino-N, N-dietylanilínu alebo p-fenyléndiamínu (obsahujúceho N,N-dietylanilín) sa metylénová violeť 3RAX získava cyklizáciou s anilínom v prítomnosti oxidačného činidla. následneJanus Green Bsa pripravuje diazotáciou a kopuláciou.
Východiskový materiál: Predpokladajme, že ako hlavný východiskový materiál použijeme 4-amino-N, N-dietylanilín. Prípad p-fenyléndiamínu (obsahujúceho N,N{6}}dietylanilín) môže vyžadovať ďalšie kroky na oddelenie alebo syntézu požadovaného N,N{7}}dietylsubstituovaného p-fenyléndiamínu, ale tu sa zameriame na prípad jediného východiskového materiálu.
Cieľ: Cyklizovať 4-amino-N,N-dietylanilín s anilínom alebo inými vhodnými zlúčeninami za vzniku benzoheterocyklickej štruktúry podobnej metylénovej violeti 3RAX. Najprv sa 4-amino-N,N-dietylanilín prevedie na ľahšie cyklizovateľný medziprodukt pomocou niektorých spôsobov, ako je acylácia, kondenzácia atď., a potom sa medziprodukt cyklizuje anilínom.
Príklad reakcie (nie priama, len na ilustráciu):
Acylačná reakcia (tvorba amidového medziproduktu): 4-amino-N,N-dietylanilín reaguje s acylchloridom alebo anhydridom za vzniku zodpovedajúceho amidu.
4-amino-N,N-dietylanilín+acylchlorid → amidový medziprodukt+HCl
Kruhová reakcia (hypotéza): Amidový medziprodukt sa cyklizuje s anilínom za podmienok katalyzátora a/alebo zahrievania.
Amidový medziprodukt+anilín → medziprodukt podobný metylénovej violeti 3RAX
Účel: Zabezpečiť, aby medziprodukt obsahoval aromatické primárne amíny pre následné diazotačné reakcie.
Príklad reakcie (ak je medziproduktom už aromatický primárny amín, tento krok preskočte):
Ak medziproduktom nie je aromatický primárny amín, môže byť potrebné ho previesť na aromatický primárny amín redukciou, hydrolýzou alebo inými reakciami.
Neprimárny amínový medziprodukt+redukčné činidlo/hydrolyzačné činidlo → aromatický primárny amínový medziprodukt
Cieľ: Previesť aromatické primárne amínové medziprodukty na diazóniové soli.
Chemická rovnica:
Aromatický primárny amínový medziprodukt + kyselina dusitá + kyselina → diazóniová soľ + voda
Poznámka: Diazotačná reakcia sa zvyčajne uskutočňuje pri nízkych teplotách (napríklad pod 0 °C) a za kyslých podmienok, aby sa zabránilo rozkladu diazóniových solí.
Cieľ: Spojiť diazóniové soli s vhodnými fenolickými alebo aromatickými amínovými zlúčeninami za vzniku Jianna Green B.
Chemická rovnica (príklad): diazóniové soli+fenolické alebo aromatické amínové zlúčeniny → C30H31ClN6+vedľajšie-produkty
Poznámka: Kopulačné reakcie sa zvyčajne uskutočňujú v alkalických podmienkach, aby sa podporila tvorba kopulačných produktov. Výber vhodných fenolových alebo aromatických amínových zlúčenín je rozhodujúci pre získanie cieľového produktu, Jianna Green B.
Ďalšie kroky: čistenie a následné{0}}spracovanie
Cieľ: Izolovať a vyčistiť Jianna Green B z reakčnej zmesi.
Metóda: Môže to zahŕňať techniky, ako je extrakcia rozpúšťadlom, kryštalizácia, rekryštalizácia, chromatografická separácia (ako je stĺpcová chromatografia, chromatografia na tenkej vrstve, HPLC atď.).
Upozornenie: Čistenie a kroky po{0}}spracovaní sú kľúčové pre získanie cieľových produktov s vysokou-čistotou. V laboratóriu môže byť potrebné tieto kroky opakovať niekoľkokrát, aby sa optimalizoval výťažok a čistota.
V biologických experimentoch,Janus Green Bsa široko používa ako bežne používané živé farbiace činidlo na pozorovanie morfológie a distribúcie mitochondrií. Jeho jedinečné farbiace vlastnosti umožňujú, aby boli mitochondrie jasne rozlíšiteľné pod mikroskopom, čo z nich robí dôležitý nástroj vo výskume bunkovej biológie. Nasleduje podrobný popis, ako pripraviť 1 % kvalitnú frakciu roztoku farbiva Jianna Green B. Tento proces zahŕňa nielen presné váženie a rozpúšťanie chemických činidiel, ale aj starostlivé zváženie faktorov, ako je teplota a výber rozpúšťadla, aby sa zabezpečilo, že konečný roztok farbiva je stabilný a účinný.
|
|
|
|
|
Experimentálna príprava
Materiály a činidlá
Jianna Green B Powder:Uistite sa, že zakúpený Jianna Green B má vysokú čistotu a neobsahuje nečistoty, čo je základom pre prípravu vysoko-kvalitných roztokov farbív.
Fyziologický roztok: Fyziologický roztok, tiež známy ako 0,9% roztok chloridu sodného, sa často používa ako rozpúšťadlo v biologických experimentoch na zníženie poškodenia buniek v dôsledku jeho osmotického tlaku, ktorý je podobný ako u ľudských buniek. V tomto experimente sa ako rozpúšťacie médium pre Jianna Green B použil fyziologický roztok.
Odmerný valec: Používa sa na presné meranie fyziologického soľného roztoku.
Kadička: Používa sa na rozpúšťanie prášku Jianna Green B.
Magnetické miešadlo (voliteľné): Používa sa na urýchlenie procesu rozpúšťania a zabezpečenie rovnomerného rozptýlenia prášku v rozpúšťadle.
Teplomer: Používa sa na monitorovanie a kontrolu teploty počas procesu rozpúšťania.
Elektronické váhy: Používajú sa na presné váženie prášku Jianna Green B.
Odmerná banka (voliteľná): Ak sa požaduje vyššia presnosť, na stanovenie objemu možno použiť odmernú banku. Ale pri tejto jednoduchej metóde prípravy možno priamo použiť kadičku a odmerný valec.
Fľaša z hnedého skla: Používa sa na skladovanie pripraveného roztoku farbiva Jianna Green B. Hnedá fľaša môže zabrániť vplyvu svetla na roztok farbiva a zachovať jeho stabilitu.
Bezpečnostná ochrana
Noste laboratórne plášte: Chráňte odev pred chemickou kontamináciou.
Noste rukavice: Zabráňte priamemu kontaktu s pokožkou s chemickými činidlami.
Noste ochranné okuliare: Aby ste zabránili striekaniu roztoku do očí.
Prevádzka v digestore: Zabezpečte cirkuláciu vzduchu v laboratóriu a znížte hromadenie škodlivých plynov.
Prípravné kroky
Pomocou elektronických váh presne odvážte 0,5 g prášku Jianna Green B. Upozorňujeme, že váhu je potrebné pred vážením nakalibrovať, aby sa zabezpečilo presné váženie.
Odvážený prášok Jianna Green B opatrne nasypte do čistej kadičky, aby prášok nelietal.
Pomocou odmerného valca presne odmerajte 50 ml fyziologického roztoku. Všimnite si, že pri meraní by mal byť odmerný valec umiestnený na stabilnom povrchu s líniou pohľadu s najnižším bodom hladiny kvapaliny, aby sa zabezpečilo presné meranie.
Odmeraný fyziologický roztok pomaly nalejte do kadičky s práškom Jianna Green B. Všimnite si, že by sa mal nalievať pomaly pozdĺž steny kadičky, aby sa zabránilo striekaniu kvapaliny alebo vytváraniu veľkého množstva peny.
Roztok jemne premiešajte sklenenou tyčinkou, aby sa prášok Jianna Green B rozpustil. Ak to podmienky dovoľujú, môže sa na miešanie použiť magnetické miešadlo, aby sa zlepšila účinnosť rozpúšťania.
Počas procesu miešania dávajte pozor na zmenu farby roztoku. Keď sa Jianna Green B rozpúšťa, roztok by sa mal postupne meniť na tmavozelenú alebo modro-zelenú.
Vzhľadom na obmedzenú rozpustnosť Jianna Green B pri izbovej teplote, aby sa zlepšila účinnosť rozpúšťania, kadička sa môže zahriať vo vodnom kúpeli na 30-40 stupňov Celzia. Upozorňujeme, že teplota by počas zahrievania nemala byť príliš vysoká, aby nedošlo k poškodeniu chemickej štruktúry Jianna Green B alebo nadmernému vyparovaniu rozpúšťadla.
Počas procesu zahrievania pokračujte v miešaní roztoku, kým sa prášok Jianna Green B úplne nerozpustí a roztok sa nestane jednotným a transparentným.
Po rozpustení skontrolujte farbu a priehľadnosť roztoku. Ak sú v roztoku nerozpustené častice alebo nerovnomerná farba, je potrebné pokračovať v miešaní alebo vhodnom zahrievaní, kým sa problém nevyrieši.
Ak je potrebné upraviť koncentráciu roztoku, množstvo fyziologického roztoku alebo prášku Jianna Green B je možné vhodne zvýšiť alebo znížiť podľa aktuálnej situácie. Ale pri tejto metóde prípravy sme činidlo presne odvážili podľa hmotnostného zlomku 1 %, takže zvyčajne nie sú potrebné žiadne ďalšie úpravy.
Nalejte pripravený roztok farbiva Jianna Green B do hnedej sklenenej fľaše a pevne ju uzavrite, aby ste zabránili kontaminácii a vyparovaniu.
Označte fľašu názvom, koncentráciou, dátumom prípravy a menom používateľa roztoku farbiva pre budúce použitie a správu.
Prevencia
Presné váženie:
Zabezpečenie presného merania zdravotného prášku zelenej B a fyziologického roztoku je kľúčom k príprave vysoko{0}}kvalitných roztokov farbív.
01
Regulácia teploty:
Počas procesu zahrievania by mala byť teplota prísne kontrolovaná, aby sa predišlo nepriaznivým účinkom na kvalitu roztoku farbiva spôsobeným príliš vysokými alebo nízkymi teplotami.
02
Primerané miešanie:
Miešanie je kľúčovým krokom na zabezpečenie rovnomerného rozpustenia zeleného prášku B vo fyziologickom roztoku a malo by sa v ňom pokračovať, kým sa roztok nestane jednotným a transparentným.
03
Bezpečná prevádzka:
Počas celého procesu prípravy prísne dodržiavajte laboratórne bezpečnostné predpisy, aby ste zaistili osobnú bezpečnosť a bezpečnosť experimentálneho prostredia.
04
Včasné použitie:
Dlhodobé skladovanie pripraveného roztoku farbiva môže stále viesť k zníženiu jeho farbiaceho účinku alebo iným chemickým zmenám. Odporúča sa použiť čo najskôr po príprave, aby sa zabezpečil najlepší efekt farbenia.
05
FAQ
1. Čo je Janus Green B?
Janus Green B je umelo syntetizované základné farbivo na báze fenazínu-, ktoré sa bežne používa pri biologickom farbení (ako je živé farbenie mitochondrií) a ako indikátor redukcie oxidácie-.
2. Aké sú hlavné účely?
Používa sa hlavne v biologických experimentoch:
- Živé farbenie mitochondrií (keďže vnútorný membránový systém mitochondrií ich môže obnoviť do bezfarebného stavu, čím sa odhalí ich redoxná aktivita).
- Detekcia bunkového dýchania (ako indikátor redukcie oxidácie-, modrá označuje oxidovaný stav a bezfarebná označuje znížený stav).
- V priemysle sa dá použiť aj ako farbivo na hodváb a kožu.
3. Aký je princíp farbenia?
V mitochondriách sa Janusova zeleň B redukuje na bezfarebný produkt enzýmami na vnútornej membráne (ako je cytochróm c oxidáza) vo vnútri mitochondrií; po opustení mitochondrií sa re-oxiduje kyslíkom na modrú farbu. Táto reverzibilná redoxná reakcia jej umožňuje špecificky indikovať mitochondriálnu aktivitu.
4. Na čo si treba dávať pozor pri užívaní?
- Koncentráciu farbiva a čas je potrebné kontrolovať (zvyčajne 0,01 % – 0,02 %), aby sa predišlo nadmernému zafarbeniu, ktoré môže interferovať s bunkovou aktivitou.
- V prípade niektorých typov buniek nemusí byť účinok farbenia uspokojivý. Podmienky treba optimalizovať.
- Skladujte v tmavej a uzavretej nádobe, aby ste zabránili rozkladu.
Populárne Tagy: janus green b cas 2869-83-2, dodávatelia, výrobcovia, továreň, veľkoobchod, kúpiť, cena, hromadne, na predaj