IPTG (izopropyl β-D-1-tiogalaktopyranozid) je dobre známe činidlo v oblasti molekulárnej biológie. Bežne sa používa ako induktor expresie rekombinantných proteínov v baktériách, najmä v systémoch E. coli. Ako spoľahlivýIPTG činidlododávateľa, často dostávame otázky o vhodných rozpúšťadlách na rozpúšťanie IPTG. V tomto blogu preskúmame rôzne rozpúšťadlá, ktoré možno použiť na rozpustenie IPTG, a rozoberieme ich výhody a obmedzenia.
Kód produktu: BM-2-5-091
Anglický názov: IPTG
Č. CAS: 367-93-1
MF: C9H1805S
MW: 238,3
EINECS: 206-703-0
Výrobca: BLOOM TECH Wuxi Factory
Technologický servis: Oddelenie výskumu a vývoja-2
Poštovné: Posielanie ako ďalší necitlivý názov chemickej zlúčeniny.
My poskytujemeIPTG činidlo, na nasledujúcej webovej stránke nájdete podrobné špecifikácie a informácie o produkte.
Produkt:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1.html
1. Voda
Voda je najpriamejším a bežne používaným rozpúšťadlom na rozpúšťanie IPTG. Je ľahko dostupný, netoxický a kompatibilný s väčšinou biologických systémov. Keď sa IPTG rozpustí vo vode, vytvorí sa číry roztok. Rozpustnosť IPTG vo vode je relatívne vysoká a pri teplote miestnosti sa môže rozpustiť až do približne 2 g/ml.
Hlavnou výhodou použitia vody ako rozpúšťadla je jej jednoduchosť a biokompatibilita. Keďže voda je médiom, v ktorom prebieha väčšina biologických reakcií, použitie vody na rozpustenie IPTG zaisťuje, že činidlo možno priamo pridať do bunkových kultúr bez vnášania akýchkoľvek potenciálne škodlivých látok. Treba však poznamenať, že roztoky IPTG vo vode nie sú príliš stabilné po dlhú dobu. Sú náchylné na degradáciu, najmä ak sú vystavené svetlu a teplu. Preto sa v prípade potreby odporúča pripravovať čerstvé roztoky IPTG vo vode.
2. Dimetylsulfoxid (DMSO)
DMSO je ďalšie obľúbené rozpúšťadlo na rozpúšťanie IPTG. Je to polárne aprotické rozpúšťadlo s vysokou rozpustnosťou pre mnohé organické zlúčeniny vrátane IPTG. DMSO môže rozpúšťať IPTG pri relatívne vysokých koncentráciách a výsledné roztoky sú stabilnejšie v porovnaní s roztokmi vo vode.
Jednou z výhod použitia DMSO je jeho schopnosť ľahko prenikať cez bunkové membrány. Táto vlastnosť môže byť prospešná, keď IPTG potrebuje rýchlo vstúpiť do buniek, aby vyvolal expresiu proteínu. DMSO však môže byť toxický pre bunky vo vysokých koncentráciách. Preto pri použití DMSO ako rozpúšťadla pre IPTG je dôležité zabezpečiť, aby konečná koncentrácia DMSO v bunkovej kultúre bola v netoxickom rozsahu. Vo všeobecnosti sa konečná koncentrácia DMSO nižšia ako 1 % považuje za bezpečnú pre väčšinu bunkových línií.
3. Etanol
Etanol je široko používané organické rozpúšťadlo, ktoré môže tiež rozpúšťať IPTG. Je relatívne lacný a má nízku toxicitu v porovnaní s niektorými inými organickými rozpúšťadlami. IPTG sa môže rozpustiť v etanole za vzniku číreho roztoku.
Výhodou použitia etanolu je jeho prchavosť. Etanol sa môže rýchlo odparovať, čo môže byť užitočné v niektorých experimentálnych zostavách, kde sa vyžaduje odstránenie rozpúšťadla. Etanol však môže mať vplyv aj na životaschopnosť buniek pri vysokých koncentráciách. Podobne ako v prípade DMSO by sa konečná koncentrácia etanolu v bunkovej kultúre mala starostlivo kontrolovať, aby sa predišlo toxicite.
4. Iné rozpúšťadlá
Okrem vyššie uvedených rozpúšťadiel existujú niektoré ďalšie rozpúšťadlá, ktoré možno použiť na rozpustenie IPTG, aj keď sa používajú menej. Napríklad metanol môže rozpustiť IPTG, ale je toxickejší ako etanol a mal by sa používať opatrne.
Je tiež potrebné poznamenať, že výber rozpúšťadla môže závisieť od konkrétnej aplikácie. Napríklad, ak sa IPTG používa v bezbunkovom proteínovom expresnom systéme, požiadavky na biokompatibilitu rozpúšťadla sa môžu líšiť od požiadaviek v systéme živých buniek.
5. Úvahy o výbere rozpúšťadla
Pri výbere rozpúšťadla na rozpustenie IPTG je potrebné zvážiť niekoľko faktorov:
Biokompatibilita: Rozpúšťadlo by malo byť kompatibilné s biologickým systémom, v ktorom sa bude IPTG používať. Napríklad pri pokusoch s bunkovou kultúrou by rozpúšťadlo nemalo byť pre bunky toxické.
Rozpustnosť: Rozpúšťadlo by malo byť schopné rozpustiť IPTG v požadovanej koncentrácii. Rôzne rozpúšťadlá majú rôzne vlastnosti rozpustnosti pre IPTG.
Stabilita: Výsledný roztok IPTG by mal byť stabilný počas požadovaného obdobia. Niektoré rozpúšťadlá môžu časom spôsobiť degradáciu IPTG.
Jednoduché použitie: S rozpúšťadlom by sa malo ľahko manipulovať a malo by sa dať ľahko skladovať. Napríklad voda sa veľmi ľahko získava a používa, zatiaľ čo niektoré organické rozpúšťadlá môžu vyžadovať špeciálne manipulačné postupy.
-
6. Súvisiace produkty
Ako dodávateľ reagencií IPTG ponúkame aj ďalšie vysoko kvalitné chemické produkty. Poskytujeme naprMyricetínový prášok CAS 529 - 44 - 2, ktorý má rôzne biologické aktivity a je široko používaný vo výskume.Prášok chloridu amónneho CAS 12125 - 02 - 9je ďalším produktom v našom katalógu, ktorý sa často používa pri biochemických a molekulárno-biologických experimentoch. APrášok kyseliny kávovej 331 - 39 - 5je dostupný aj pre výskumníkov, ktorí sa zaujímajú o jeho antioxidačné a iné vlastnosti.
7. Záver a výzva na akciu
Záverom možno povedať, že voda, DMSO a etanol sú najčastejšie používané rozpúšťadlá na rozpúšťanie IPTG, pričom každé má svoje výhody a obmedzenia. Výber rozpúšťadla závisí od špecifických experimentálnych požiadaviek. Ako profesionálny dodávateľ reagencií IPTG sme odhodlaní poskytovať vysoko kvalitné produkty a technickú podporu. Ak máte akékoľvek otázky týkajúce sa IPTG alebo iných produktov, alebo ak máte záujem o kúpu našich produktov, neváhajte nás kontaktovať pre ďalšiu diskusiu a rokovania. Tešíme sa na vás a na splnenie vašich výskumných potrieb.
Referencie
- Sambrook, J. a Russell, DW (2001). Molecular Cloning: A Laboratory Manuál (3. vydanie). Cold Spring Harbor Laboratory Press.
- Ausubel, FM, Brent, R., Kingston, RE, Moore, DD, Seidman, JG, Smith, JA, & Struhl, K. (Eds.). (2002). Aktuálne protokoly v molekulárnej biológii. John Wiley & Sons.